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薄層色譜法鑒別冠脈寧顆粒的研究

2011-02-21 02:39:24徐曉弘
中國醫(yī)藥導(dǎo)報 2011年15期
關(guān)鍵詞:薄層濾液紅花

徐曉弘,熊 鑫

大慶油田總醫(yī)院藥學(xué)部,黑龍江大慶 163001

冠脈寧顆粒由丹參、葛根、血竭、冰片等14味藥材組合而成,具有活血化瘀,行氣止痛。用于以胸部刺痛、固定不移、心悸不寧、入夜更甚、舌質(zhì)紫暗,脈沉弦為主癥的冠心病、心絞痛、冠狀動脈供血不足[1]。冠脈寧片處方收載于《中華人民共和國衛(wèi)生部藥品標準·中藥成方制劑》。本次實驗依據(jù)相關(guān)文獻并結(jié)合復(fù)方中主藥的特點,用薄層色譜法對丹參、葛根、當歸、紅花進行定性鑒別,從而更好地對“冠脈寧顆?!边M行質(zhì)量控制。

1 試劑與試藥

1.1 試藥

丹參、葛根、當歸、紅花(長春宏檢藥材公司),對照品:人參皂苷Rb1、Rg1、三七皂苷R1、木犀草素(中國藥品生物制品檢定所)。

1.2 試劑

正丁醇、甲醇、磷酸、正己烷、乙酸乙酯、氯仿、乙醚。

2 實驗方法與結(jié)果

2.1 性狀

本品呈顆粒狀,棕褐色;氣香,味微苦。

2.2 鑒定分析

薄層色譜法鑒別參照《中國藥典》(2005年版)一部項下薄層鑒別方法,并結(jié)合相關(guān)的文獻對丹參、當歸、紅花、葛根進行薄層鑒別,再對鑒別結(jié)果進行定性分析。

2.2.1 薄層鑒別丹參 取本品5 g,研成細粉。加三氯甲烷50 ml,加熱回流1.5 h,濾過后藥渣備用,濾液蒸干,殘渣加乙醇3 ml使溶解、濾過,濾液作為供試品溶液。丹參在處方中為主藥,其有效成分丹參酮ⅡA含量直接影響藥效的發(fā)揮[2]。所以另取丹參酮ⅡA作為對照品,加入乙醇制成每1 ml含0.5 mg的丹參酮ⅡA對照品溶液。按照《中國藥典》(2005年版)一部附錄ⅥB薄層色譜法中薄層色譜法進行試驗,然后分別吸取4μl上述兩種溶液,在同一硅膠G薄層板上分別點樣,其中硅膠板的黏合劑是羧甲基纖維素鈉,展開劑為苯-乙酸乙酯,配制比例為19∶1,展開,晾干。結(jié)果顯示:在供試品色譜中,在與對照品色譜斑點相應(yīng)的位置上,顯相同的暗紅色斑點。

2.2.2 薄層鑒別紅花 紅花具有活血通經(jīng)、祛瘀止痛等功效,其藥理作用主要表現(xiàn)為抗凝血、抗血栓[3],研究結(jié)果亦有表明紅花具抑制炎癥反應(yīng)的作用。取本樣品3 g,加入80%的丙酮25 ml后,進行30 min的超聲提取,濾過,濾液作為試驗的供試品溶液并濃縮至5 ml。再取3 g紅花對照藥材細粉,同樣以80%的丙酮溶解并超聲30 min,所得濾液作為對照溶液。不含紅花藥材的陰性對照液也按處方的比例制得。按照《中國藥典》(2005年版)一部附錄ⅥB中薄層色譜法進行試驗,吸取對照藥材溶液、陰性對照液和三批供試品溶液各5μl,再統(tǒng)一用醋酸乙酯-甲酸-水-甲醇按 7∶2∶2∶0.4 的比例為展開劑的硅膠H薄層板上分別點樣,展開薄層板,晾干。結(jié)果:供試品色譜中,與對照品色譜相同位置上,顯出的斑點顏色是相同的,無陰性干擾。

2.2.3 薄層鑒別當歸 當歸主要成分含揮發(fā)油和水溶性物質(zhì)兩大類。揮發(fā)油中以藁本內(nèi)酯和正丁烯酉夫內(nèi)酯為主要成分[4]。取本品內(nèi)容物約4 g,研細后,加入石油醚(60~90℃)30 ml,經(jīng)過40 min的超聲處理后,濾過并蒸干濾液,用3 ml的無水乙醇將殘渣溶解,作為供試品溶液。對照品溶液的配制則另取5 g當歸對照藥材,相同于供試品溶液的方法配制完成。按照《中國藥典》(2005年版)一部附錄ⅥB中薄層色譜法試驗方法,對上述兩種溶液各吸取5μl,在同一硅膠G薄層板上點樣,展開劑以9∶1比例配制的正己烷-醋酸乙酯溶液,展開薄層板,晾干。結(jié)果:在365 nm的紫外燈下檢視,相應(yīng)于對照藥材色譜的位置上,供試品色譜顯相同顏色的熒光斑點[5]。2.2.4葛根的薄層鑒別[6]取本品內(nèi)容物5 g,加甲醇50 ml,超聲提取45 min,濾過,蒸干濾液,用水25 ml加入將殘渣溶解,濾過,用乙酸乙酯提取,每次20 ml,共提取5次。合并乙酸乙酯層,用無水硫酸鈉吸去多余水分,濾過,蒸干乙酸乙酯,殘渣加甲醇1 ml使溶解,過濾,濾液作為供試品溶液。對照品溶液配制則用甲醇溶解葛根素對照品,制成每1 mg/ml的溶液。另取除葛根外的的陰性樣品粉5 g與等量的基質(zhì)混合進行均勻,同法制得了陰性供試品溶液。分別吸取4μl上述對照品溶液、樣品及陰性溶液,再統(tǒng)一以氯仿-甲醇-乙酸乙酯-水按3∶3∶4∶0.8的比例為展開劑的硅膠G薄層板上分別點樣,展開薄層板,取出,晾干,置365 nm的紫外線燈下檢視,相同于對照品色譜位置上,供試品色譜顯相同顏色的熒光斑點。

3 討論

活血通絡(luò)片由丹參、沒藥(炒)、血竭、雞血藤、延胡索(醋制)、郁金、當歸、制何首烏、桃仁(炒)等14味藥組成。以丹參為君藥,內(nèi)可以化臟腑之瘀滯,外可通經(jīng)而宣導(dǎo)氣機。臣藥雞血藤補血活血,疏通經(jīng)絡(luò);延胡索、紅花活血化瘀,行氣止痛,血竭祛瘀定痛。佐用當歸、何首烏和黃精補血生精,養(yǎng)心安神,體現(xiàn)標本兼具之用[7]。本次試驗采用薄層色譜法(TLC)對本制劑中的四味藥材丹參、當歸、葛根、紅花進行鑒別研究,對照實驗均以四味藥材各自的藥材中相應(yīng)有效成分及陰性對照品進行試驗。經(jīng)過多次鑒別實驗后,四種藥材實驗測得的斑點均清晰可見,具有良好的重現(xiàn)性,且陰性無干擾。綜上,用薄層色譜法鑒別冠脈寧顆粒的實驗具有操作簡單、穩(wěn)定、重現(xiàn)性及專屬性都很強的特點,可作為此類中藥制劑質(zhì)量控制的定性依據(jù),為今后標準的進一步修訂提供了依據(jù)。

[1]張雪慧.HPLC法測定冠脈寧顆粒中丹參素鈉的含量[J].現(xiàn)代中醫(yī)藥,2008,28(1):60-61.

[2]賈艷寧,吳麗紅,張慶.復(fù)方丹參片中丹參提取工藝研究[J].黑龍江醫(yī)藥,2004,17(5):365-366.

[3]徐如英,童樹洪.紅花的化學(xué)成分及藥理作用研究進展[J].綜述報告,2010,19(20):86-87.

[4]杜天璽,郭延生,華永麗,等.當歸炭飲片質(zhì)量標準研究[J].時珍國醫(yī)國藥,2010,21(9):2156-2158.

[5]中華人民共和國藥典委員會.《中華人民共和國藥典》[S].北京:化學(xué)工業(yè)出版社,2005:103,109.

[6]劉紅霞,孫志坡,梁軍.冠脈寧軟膠囊薄層色譜鑒別研究[J].方藥縱橫,2007,34(3):343-344.

[7]劉萬利.冠脈寧片治療心血瘀阻型胸痹療效觀察[J].中國現(xiàn)代藥物應(yīng)用,2009,3(18):95-96.

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