聶韡,朱培林*,黃麗莉,葉金山
(江西省林業(yè)科學(xué)院,江西 南昌 330032)
廣東紫珠藥材的研究迸展
聶韡,朱培林*,黃麗莉,葉金山
(江西省林業(yè)科學(xué)院,江西 南昌 330032)
從栽培技術(shù)、化學(xué)成分、成分檢測與質(zhì)量控制、藥理作用等方面對廣東紫珠藥材的研究進(jìn)展進(jìn)行綜述,并探討了今后研究的主要方向。
廣東紫珠;栽培技術(shù);化學(xué)成分;藥理作用
中藥廣東紫珠基源為馬鞭草科紫珠屬植物廣東紫珠Callicarpa kwangtungensis Chun,主要分布于浙、贛、閩、鄂、湘、粵、桂、貴、云等地,新收載入《中國藥典》2010版一部,其藥用部位為干燥的莖枝及葉,具有收斂止血,散瘀,清熱解毒的功能[1]。用于衄血,咯血,吐血,便血,崩漏,外傷出血等,是抗宮炎片和抗宮炎膠囊等中成藥的主要原料。本文從栽培及采收、化學(xué)成分、成分檢測與質(zhì)量控制、藥理作用等方面對廣東紫珠藥材的研究進(jìn)展進(jìn)行了闡述,以期為進(jìn)一步開展應(yīng)用和臨床合理用藥提供科學(xué)依據(jù)。
廣東紫珠近年來市場需求量不斷增大,由于人工栽培技術(shù)的制約,目前制藥企業(yè)只能主要依靠天然野生資源[2],但野生資源難以滿足社會需求,因此栽培廣東紫珠已成為我國廣東紫珠藥材的主要來源,目前已有很多研究者對廣東紫珠的栽培技術(shù)進(jìn)行研究。
汪冶等[3]對廣東紫珠種籽人工快速繁殖方法進(jìn)行研究,采用將成熟紫珠果實保存于2~8℃的環(huán)境中,于播種前去其果皮果肉,播種于8℃以上的苗床營養(yǎng)土中;當(dāng)幼苗長至15~20cm時移入pH5.5~6.5的酸性砂質(zhì)壤土中,保持濕潤、防澇、施肥、除草、防蟲,培養(yǎng)5~8個月后,于12月至次年2月即可移栽。陸安智等[4]對人工快速培育廣東紫珠苗木的方法進(jìn)行研究,選擇p H4~7、含有機肥的砂質(zhì)壤土,選用1~2年生健壯木質(zhì)化紫珠枝條,斜剪成10~15cm插條進(jìn)行扦插,夏、秋梢抽發(fā)期噴施葉肥,控制苗高100cm以內(nèi)以矮化壯苗,扦插后培育7~8個月可出圃移栽。杜安等[5]對廣東紫珠藥材的高產(chǎn)氣象條件進(jìn)行了研究,結(jié)果顯示光輻射量過大,易使樹勢不良,影響產(chǎn)量和質(zhì)量;且廣東紫珠喜溫又喜濕,以年降水量1500mm為宜。彭益萍等[6]從廣東紫珠的馴化、繁育、栽培等方面探討了廣東紫珠的丘陵山地人工栽培高產(chǎn)技術(shù)模式,研究表明丘陵山地栽培廣東紫珠,初植密度、施肥和采收次數(shù)對廣東紫珠產(chǎn)量的影響均達(dá)顯著水平,以初植密度和施肥對廣東紫珠產(chǎn)量影響最大。鄒曉祥等[7-8]研究表明山田中栽植廣東紫珠,栽植密度30cm×30cm,施肥60 0k g·hm-2的用量為最佳栽培方式,產(chǎn)量最高。歐陽貴明等[9]對廣東紫珠生態(tài)生物學(xué)特征、人工繁殖栽培技術(shù)進(jìn)行了系統(tǒng)的試驗研究,結(jié)果表明選用1年生枝條、當(dāng)年或多年枝條均可,枝條切成15~20cm,以中、基部較好,用100×10-6的IBA和N A A為好,藥劑處理16~20h后,在陰雨天直接插到整好的山地上。
吳質(zhì)瑰等[10]對廣東紫珠藥材進(jìn)行了性狀及顯微鑒定研究,廣東紫珠藥材性狀特征明顯,葉下表面具有黃色脈點。顯微特征中可觀察到腺鱗及多種類型的非腺毛;葉片主脈部位結(jié)構(gòu)特殊,多個維管束與后壁組織排列成環(huán)狀。
廣東紫珠藥材中主要含有黃酮、苯丙素糖苷、三萜、酚酸等化學(xué)成分。
對廣東紫珠藥材化學(xué)成分的研究目前主要集中于黃酮類成分。已從中分離出的黃酮類化合物有5,4′-二羥基-3,7,3′-三甲氧基黃酮(5,4′-dihydroxy-3,7,3′-trimethoxy flavone)、蘆丁(rutin)、槲皮素(quercetin)、槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖-α-L-鼠李糖苷(quercetin-3-O-β-D-g luco pyranosyl-α-L-r ha mnopyrano side)、鼠李秦素(rhan matin)、華良姜素(kumatakenin)、岳樺素 (emanine)、芹菜素葡萄糖醛酸苷(apigenin-7-O-β-D-g lucopyranside)、木犀草素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖醛酸苷(luteolin-7-O-β-D-glucopyranside)、木犀草素(luteolin)、velutin[11-15]。
廣東紫珠藥材收載入 《中國藥典》2010版一部,其中作為質(zhì)量控制指標(biāo)的即為兩種苯丙素糖苷類成分,提示其為廣東紫珠的有效化學(xué)成分之一。目前從廣東紫珠藥材中主要分離得到3種苯丙素糖苷類成分,分別為連翹酯苷B(for sythiasideB)、金poliumoside)[16]CallicarposideA[17]石蠶苷 ( 、 。
目前從廣東紫珠中分離得到的三萜類成分主要有齊墩果酸 (oleanolicacid)、熊果酸(ursolicacid)、白樺酸(betulinicacid)[11-12]。
已分離得到的本類化合物主要有水楊酸 (salicylicacid)、丁香酸(syringicacid)、異香草酸(isovanillic acid)、沒食子酸(gallicacid)[11,13]。
有報道從廣東紫珠藥材還分離得到與紫珠屬植物共有的二萜類成分紫珠萜酮(calliterpenone),以及丙氨酸(alanine)、琥珀酸(succinicacid)、胡蘿卜苷(daucosterol)、β-谷甾醇(β-sitosterol)等其他類成分[11-13]。
《中國藥典》2010年版一部[1]新收載了廣東紫珠藥材,以連翹酯苷B和金石蠶苷兩種苯丙素糖苷類成分為指標(biāo)進(jìn)行HPLC含量測定以控制廣東紫珠藥材的質(zhì)量。前期已有研究者以廣東紫珠中不同成分的含量為指標(biāo),采用不同分析方法對其進(jìn)行成分檢測及質(zhì)量控制。
張小波等[18-19]用薄層色譜法對抗宮炎片中廣東紫珠進(jìn)行了鑒別,以木犀草素為對照,三氯甲烷-甲醇-甲酸(20∶4∶0.8)為展開劑,噴以三氯化鐵試液顯色,該方法用于抗宮炎片中廣東紫珠的鑒別,靈敏、準(zhǔn)確、可靠、重現(xiàn)性好。黃麗莉等[20]為確定廣東紫珠適宜采收期和采收模式,采用紫外分光光度法測定廣東紫珠總黃酮含量,以蘆丁為對照,測定波長為510nm,結(jié)果顯示廣東紫珠總黃酮含量的積累與植物生長相一致,表現(xiàn)出隨著植株的生長,總黃酮含量也隨之增長的規(guī)律;不同部位器官總黃酮含量有顯著差別,次序為:葉>小莖枝>果>根>主干莖,其中葉的總黃酮含量大大高于其他器官。
朱培林等[21]采用紫外-可見光分光光度法,測定不同時期、不同部位、不同栽培和采收方式、不同栽培環(huán)境條件的廣東紫珠藥材樣品中總黃酮的含量,結(jié)果顯示廣東紫珠藥材的總黃酮含量隨著生長期增長,采收期宜在即將落葉時;植株的總黃酮主要分布在葉片中,莖干的總黃酮含量非常低,可采用留干采收方式以利于來年枝葉萌發(fā);野生廣東紫珠藥材的總黃酮含量略高于栽培,但差異不大。施肥是藥材增產(chǎn)的重要措施,試驗中施用沼氣肥與不施肥的廣東紫珠藥材總黃酮含量差異不明顯,選擇沼氣肥等肥料類型較好。
楊義芳等[22-23]對總黃酮部位的提取及純化富集方法進(jìn)行了研究,采用50%~60%的乙醇對廣東紫珠進(jìn)行回流提取,該方法簡單易行,提取效果良好。再通過調(diào)節(jié)廣東紫珠提取液的p H值來改變廣東紫珠總黃酮部位的吸附性能,并采取靜態(tài)吸附的方式有效地改善了廣東紫珠總黃酮部位的富集效率。另外提取液上柱吸附后僅用少量的水即可達(dá)到去除雜質(zhì)的效果。
劉成紅等[14]采用HPLC測定廣東紫珠及其制劑宮復(fù)康膠囊中木犀草素,藥材經(jīng)乙醇提取后加入鹽酸進(jìn)行酸水解,得到供試品溶液,注入高效液相色譜儀測定,經(jīng)考察檢測波長選擇350nm,流動相選擇甲醇-磷酸鹽溶液,得到兩批不同廣東紫珠藥材中木犀草素的含量分別為0.388%和0.422%,3批宮復(fù)康膠囊中木犀草素的含量分別為0.280%,0.285%,0.271%。
周國平等[16]采用HPLC測定江西不同產(chǎn)地的廣東紫珠藥材中連翹酯苷B和金石蠶苷的含量,結(jié)果顯示6個不同產(chǎn)地的10批藥材中連翹酯苷B和金石蠶苷的含量均接近,研究者同時測定了紫珠屬中大葉紫珠和紫珠藥材中這兩種成分的含量,結(jié)果連翹酯苷B含量較高,但金石蠶苷的含量均很低。周國平等[24]還用HPLC測定不同來源抗宮炎片中連翹酯苷B和金石蠶苷的含量,結(jié)果顯示3批抗宮炎片中均含連翹酯苷B和金石蠶苷,二者總量之和分別為5.6,3.8,5.5m g/片,說明連翹酯苷B和金石蠶苷可以作為廣東紫珠及其中成藥的含量控制指標(biāo)。
周伯庭等[25]研究了廣東紫珠乙醇提取物對小鼠斷尾出血時間的影響進(jìn)行研究,結(jié)果顯示廣東紫珠提取物大小劑量組明顯縮短小鼠出血時間,止血效果顯著。
洪燕龍[15]將醋酸注射于小鼠腹腔造成疼痛模型,觀察廣東紫珠總黃酮對小鼠疼痛扭曲的影響,結(jié)果顯示廣東紫珠總黃酮大、中、小3個劑量均可不同程度地抑制小鼠扭體反應(yīng),表現(xiàn)為延長扭體反應(yīng)潛伏期,減少單位時間內(nèi)動物扭體次數(shù)。其中中劑量組則顯著延長扭體反應(yīng)潛伏期 (P<0.0 1),而小劑量組與對照組比較無顯著性差異。
周伯庭等[25]對廣東紫珠乙醇提取物對傷寒沙門氏菌、金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、乙型溶血性鏈球菌、肺炎雙球菌5種菌種進(jìn)行抗菌實驗,結(jié)果顯示,廣東紫珠提取物對金黃色葡萄球菌、傷寒沙門氏菌和肺炎雙球菌等均有不同程度的抑菌作用,其中以金黃色葡萄球菌、傷寒沙門氏菌的抑菌作用最強。
謝俊大[26]研究表明由廣東紫珠和益母草兩味中藥組成的宮炎凈片可明顯減輕宮頸炎過程中的黏膜及其下層白細(xì)胞浸潤、血管增生,鱗狀上皮增生、水腫、潰瘍,柱狀上皮鱗化等病理性損傷,可顯著抑制急、慢性炎癥的發(fā)生;下調(diào)局部P G E2、I L-2的水平,抑制C P的異?;罨赡苁瞧溲装Y干預(yù)的作用環(huán)節(jié),而且對炎癥過程中的血液流變學(xué)異常具有一定的改善作用。
洪燕龍[15]對廣東紫珠總黃酮部位進(jìn)行抗炎作用研究,用二甲苯涂擦小鼠耳廓造成急性炎癥模型,廣東紫珠總黃酮小、中、大各劑量組均可明顯抑制小鼠耳廓腫脹率,呈劑量效應(yīng)相關(guān)關(guān)系,表明廣東紫珠總黃酮可以對抗二甲苯引起的小鼠耳廓腫脹,有較明顯的抗炎作用。廣東紫珠總黃酮對醋酸致小白鼠腹腔毛細(xì)血管通透性增加的影響實驗,結(jié)果表明廣東紫珠總黃酮小、中、大各劑量組只有小劑量組對炎癥早期毛細(xì)血管通透性增加具有一定的作用。廣東紫珠總黃酮對小白鼠棉球肉芽腫慢性炎癥模型的影響實驗,結(jié)果表明廣東紫珠總黃酮小、中、大各劑量組均可明顯減小小鼠肉芽腫,其中中劑量組更為明顯,說明廣東紫珠總黃酮可以對抗棉球引起的肉芽增生,有較明顯的抗炎作用。
廣東紫珠為民間臨床婦科及各科出血癥的常用藥物,其野生資源日漸匱乏,野生變家種已成為我國廣東紫珠藥材的主要來源,與野生的廣東紫珠藥材相比,人工栽培品的質(zhì)量如何,尚有待進(jìn)一步研究。作為 《中國藥典》2010版新收入的藥材品種,目前對廣東紫珠化學(xué)成分、藥理作用及臨床應(yīng)用方面的研究都不夠深入,今后應(yīng)進(jìn)一步加強對廣東紫珠藥效物質(zhì)基礎(chǔ)研究,為廣東紫珠類中成藥的標(biāo)準(zhǔn)化和質(zhì)量控制以及新藥開發(fā)提供理論依據(jù)。
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中央財政林業(yè)科技推廣示范資金項目——森林藥材良種繁育與豐產(chǎn)栽培技術(shù)示范 ([2010JXTG-04)
*朱培林,E-mail:yczpl@126.com
2011-04-08)