王小鶯，李麟，韓曉萍，胡路峰，陳勤云

(江西農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院，江西 南昌 330045)

1 材料與方法

1.1 供試藥品

復(fù)方苦參注射液，主要成分為苦參、博落回、檳榔等五種中藥提取物，由課題組研制，規(guī)格：25mg/5ml，滅菌保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2 試驗(yàn)菌株

大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、沙門氏菌均由江西農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院預(yù)防獸醫(yī)教研室保存。

1.3 試驗(yàn)動(dòng)物

昆明系小白鼠，50只，雌雄各半，體重20～30g，購自南昌大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心。

1.4最低抑菌濃度測(cè)定方法

將保存菌種于普通瓊脂平板，至37℃恒溫箱培養(yǎng)18h，次日挑選單個(gè)菌落1～2個(gè)接種于2ml肉湯培養(yǎng)基中培養(yǎng)。采用活菌計(jì)數(shù)法測(cè)得細(xì)菌的生長濃度，上述菌液臨用前用營養(yǎng)肉湯稀釋至含菌量約為104～105個(gè)/ml的菌液。采用戴自英的試管二倍稀釋法分別測(cè)定最小抑菌濃度（MIC）。

1.5 急性毒性試驗(yàn)測(cè)定方法

取健康小鼠50只，隨機(jī)分為5組，預(yù)試測(cè)得復(fù)方苦參注射液肌肉注射LD100為37.5mg/kg，LD0為25mg/kg，按改良寇氏法[1]計(jì)算每個(gè)組的劑量。各組按劑量肌肉注射后立即觀察中毒癥狀，記錄中毒事件、死亡情況。

2 結(jié)果

2.1 最低抑菌濃度測(cè)定結(jié)果

復(fù)方苦參注射液對(duì)豬大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、沙門氏菌的最低抑菌濃度分別為78μg/ml、0.4μg/ml、1250μg/ml.

2.2 急性毒性試驗(yàn)測(cè)定結(jié)果

中毒癥狀：大劑量組小鼠肌肉注射約1分鐘后動(dòng)物表現(xiàn)呼吸加快，痙攣，嚴(yán)重的呈劃水樣運(yùn)動(dòng)。約2分鐘后，出現(xiàn)步態(tài)不穩(wěn)，后肢無力，四肢痙攣似青蛙跳。中間各劑量癥狀稍輕，開始呼吸急促，隨后精神沉郁，閉眼，不動(dòng)，死前均出現(xiàn)痙攣。低劑量組無明顯中毒癥狀，全部存活。

采用改良寇氏法計(jì)算LD50，小鼠肌肉注射復(fù)方苦參注射液測(cè)定半數(shù)致死量為34.67mg/kg，95%置信區(qū)間為26.27mg/kg到38.87mg/kg。

3 討論

復(fù)方苦參注射液，主要成分為苦參、博落回、檳榔等五種中藥提取物?？鄥⒕哂锌咕?、消炎、解熱作用。研究表明，抗菌活性成分為苦參堿，1%的苦參堿對(duì)痢疾桿菌、大腸桿菌、變形桿菌及金黃色葡萄球菌均有明顯抑制作用。博落回為罌粟科博落回屬植物，其性寒，味辛、苦、澀、有殺蟲、消腫止痛作用，有一定的毒性。

本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，復(fù)方苦參注射液對(duì)葡萄球菌濃度遠(yuǎn)遠(yuǎn)強(qiáng)于大腸桿菌，與萬學(xué)攀[2]、崔一喆[3]報(bào)道的博落回、苦參對(duì)葡萄球菌的抑菌作用均強(qiáng)于大腸桿菌一致。但本實(shí)驗(yàn)結(jié)果測(cè)得的復(fù)方苦參注射液對(duì)葡萄球菌MIC0.4μg/ml遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于報(bào)道的苦參單方和博落回單方對(duì)葡萄球菌MIC，可能是復(fù)方制劑中各成分產(chǎn)生了協(xié)同作用。

小鼠肌肉注射復(fù)方苦參注射液表現(xiàn)的急性中毒癥狀與博落回生物堿的中毒癥狀一致。研究表明，苦參及檳榔的毒性都比較小，而博落回所含生物堿具有一定的毒性作用。而不同的給藥途及不同劑型對(duì)博落回毒性有一定的影響。經(jīng)口給藥的毒性較小，粉劑毒性?。蛔⑸鋭┒拘暂^大。小白鼠灌胃博落回粉混懸液的急性實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，博落回所含生物堿中提取的乙氧基血根堿與乙氧基白屈菜紅堿的鹽酸水溶液腹腔注射小白鼠半數(shù)致死量為18mg/kg[5];博落回總堿經(jīng)口的LD50為1657mg/kg[5]。由于博落回成分較為復(fù)雜，且有一定的毒性，使博落回的應(yīng)用受到一定限制，含博落回生物堿的注射液在臨床使用時(shí)應(yīng)嚴(yán)格掌握劑量，不可隨意加大劑量避免中毒。

[1] 沈建忠.動(dòng)物毒理學(xué)[M]北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，2002∶92～94

[2] 崔一喆，王玉梅，王新.苦參與甲氧芐啶聯(lián)用的抗菌增效作用研究.黑龍江畜牧獸醫(yī)[J]2009（12）：13

[3] 王學(xué)攀，趙寶玉，趙延濤,等.博落回生物堿成分初步分析及其抑菌活性部位篩選[J].黑龍江畜牧獸醫(yī)，2007（2）：89～90

[4] 王景，楊軍，李曉山.博落回粉的急性和長期毒性試驗(yàn)[J].安徽醫(yī)學(xué)，1998,19(13)∶76

[5] 劉靖，張石蕊，袁忠宇.博落回生物堿的研究進(jìn)展[J].廣東飼料，2009,18（4）∶28～330