張玉軍， 鐘正賢， 陳敬民， 李開雙， 李友娣， 李翠紅

(1.廣西骨傷醫(yī)院，廣西 南寧530012;2.廣西中醫(yī)藥研究院，廣西 南寧530022)

一點紅，別名羊蹄草、葉下紅等，系菊科植物一點紅Emilia sonchifolia(L)DC.的全草，分布于我國華南、華中和西南等地。性涼，味微苦，具有清熱解毒，消炎，利尿，散瘀消腫等功效。臨床上常用于治療上呼吸道感染、口腔潰瘍、肺炎、泌尿道感染、乳腺炎、癤腫瘡瘍、皮膚濕疹等癥?；瘜W成分含生物堿、黃酮類、三萜類、酚類等。藥理研究證實一點紅提取物對金黃色葡萄球菌、綠膿桿菌、傷寒桿菌等有抑制作用［1］，動物試驗顯示一點紅提取物具有抗炎、鎮(zhèn)痛、保肝、免疫增強作用［2-3］。一點紅藥材現(xiàn)已作為婦科用中成藥花紅片的主要原料，主治婦科炎癥。為了進一步探討其主要藥效學以外更為廣泛的藥理作用及應用安全性，為臨床應用提供科學依據(jù)。本實驗對其進行一般藥理學研究，觀察其對神經(jīng)系統(tǒng)、心血管系統(tǒng)和呼吸系統(tǒng)的影響。現(xiàn)報道如下。

1 材料

1.1 藥物制備 (1)一點紅水提物制備:全草干燥后切碎，粉碎成粗粉，加8倍量水，浸泡后加熱煮沸提取，煮提兩次，合并濾液。濾液水浴濃縮至稠膏狀，得水提取物，得率為16.67%，1 g稠膏含2.1 g生藥，批號:20070305。(2)一點紅醇提物制備:全草干燥后切碎，粉碎成粗粉，置燒瓶中，加8倍量95%乙醇，浸泡后加熱回流提取，回流提取兩次，合并濾液。濾液減壓回收乙醇，揮盡乙醇并水浴濃縮至稠膏狀，得醇提取物，得率為6.65%。1 g稠膏含6.8 g生藥，批號:20070308。一點紅藥材的水提物和醇提取物，由廣西中醫(yī)藥研究院中藥化學研究所提供?？瞻讓φ占耙稽c紅水提物、醇提物均加入數(shù)滴吐溫-80研磨后用1%CMC溶液配制成所需濃度，灌胃給藥體積均為20 mL/kg。

1.2 劑量與分組 給藥組分別以一點紅水提物5.0、2.5 g藥材/kg，一點紅醇提物6.4、3.2 g藥材/kg劑量給藥，小鼠灌胃(ig)20 mL/kg，大鼠10 mL/kg，分別相當于推薦臨床劑量的10～20倍。

1.3 動物 昆明種小鼠，體質(zhì)量(20±2)g;Wistar種大鼠，體質(zhì)量(200±20)g，雌雄各半，均由廣西醫(yī)科大學實驗動物中心提供，SPF級，合格證號:SCXK桂2003—0003。

1.4 儀器 BL-310生物信號采集處理系統(tǒng)，成都泰盟科技有限公司出品。

2 方法

2.1 對神經(jīng)系統(tǒng)的影響 采用小鼠自發(fā)活動實驗方法［5］。取小鼠50只，均分5組，每組10只。將小鼠分別單個投入活動箱(31 cm×19 cm×18 cm)中，適應5 min后，記錄給藥前2 min內(nèi)小鼠走動時間及雙前肢向上抬舉次數(shù)為指標，先測定各組小鼠給藥前的活動正常值，隨后分別灌胃(ig)給一點紅水提物5.0、2.5 g藥材/kg，一點紅醇提物6.4、3.2 g藥材/kg，對照組給等體積水。觀察給藥后小鼠一般行為、姿勢、步態(tài)、有無流涎、肌顫等變化，并在給藥后0.5、1.0、2.0、3.0、4.0 h測定2 min內(nèi)小鼠自主活動情況，給藥組作藥前藥后配對比較，并與對照組作組間比較T檢驗。

2.2 對呼吸及心血管系統(tǒng)的影響［6］取大鼠50只，雌雄各半，隨機分成5組，每組10只，動物以40 mg/kg戊巴比妥鈉腹腔麻醉，仰臥位固定于手術臺上，頸左總動脈插管接壓力換能器，于大鼠胸部劍突處接張力換能器，在大鼠四肢接心電圖Ⅱ?qū)?lián)接頭，各換能器及心電導聯(lián)與BL-310生物信號采集處理系統(tǒng)連接，以記錄動物血壓、呼吸及心電圖。動物各記錄指標穩(wěn)定20 min后開始試驗，分別記錄給藥前、給藥后 10 min、0.5 h、1 h、2 h、3 h 的大鼠血壓、呼吸和心電圖情況。各組分別統(tǒng)計各時間的均數(shù)、方差，與給藥前進行組內(nèi)T檢驗和與對照組進行組間T檢驗，經(jīng)檢測其顯著性差異。

3 結果

3.1 對小鼠自主活動的影響 結果見表1，表2。結果表明，經(jīng)用藥前后比較并與對照組比較，一點紅水提物對小鼠行為、姿勢、步態(tài)等異常，無流涎、肌顫等變化，對小鼠神經(jīng)系統(tǒng)自主活動無明顯影響;而醇提物2個劑量組則在0.5～2.0 h均出現(xiàn)顯著減少小鼠自主走動時間和抬前腳次數(shù)，具有一定鎮(zhèn)靜作用，其他時間表現(xiàn)同水提物，對小鼠自主活動無明顯影響。

表1 對小鼠的自主活動(小鼠抬前腳次數(shù))的影響(± s，n=10)

表1 對小鼠的自主活動(小鼠抬前腳次數(shù))的影響(± s，n=10)

注:與給藥前比較，*P＜0.05;與對照組比較，#P＜0.05。

組別 劑量/(g/kg) 給藥前 給藥后不同時間小鼠抬前腳次數(shù)/2 min 0.5 h 1 h 2 h 3 h 4 h對照組 13.9±2.6 10.7±1.7 12.7±1.4 11.9±1.8 13.7±1.7 12.6±1.5一點紅水提 2.5 11.4±3.8 9.0±3.2 10.0±3.0 11.1±3.3 12.0±3.4 12.0±3.5 5.0 13.1±3.7 10.0±3.5 12.0±2.5 11.0±3.3 12.0±3.1 13.0±3.2一點紅醇提 3.2 12.3±3.8 7.2±3.7*# 8.4±3.5*# 8.0±3.3*# 12.6±3.5 10.4±3.7 6.4 11.9±2.6 7.4±3.9*# 8.2±4.0*# 8.6±4.2*#10.4±3.1 11.4±2.0

表2 對小鼠的自主活動(小鼠走動時間)的影響( ± s，n=10)

表2 對小鼠的自主活動(小鼠走動時間)的影響( ± s，n=10)

注:與給藥前比較，*P＜0.05，＊＊P ＜0.01;與對照組比較，#P ＜0.05。

組別 劑量/(g/kg) 給藥前 給藥后不同時間小鼠走動時間/2 min 0.5 h 1 h 2 h 3 h 4 h對照組 33.4±4.5 29.1±5.1 32.1±3.8 30.1±4.2 32.1±5.1 33.1±4.0一點紅水提 2.5 33.1±4.4 32.3±3.3 32.4±4.3 29.6±3.7 28.6±5.2 31.6±3.3 5.0 30.6±5.8 30.2±4.9 31.2±4.9 29.8±4.5 30.0±4.5 29.7±4.3一點紅醇提 3.2 30.5±5.0 19.0±5.8*# 20.0±4.8*# 19.0±5.8*# 26.0±5.8 27.0±5.5 6.4 29.1±6.0 16.5±6.5＊＊# 16.5±5.6＊＊# 16.5±6.4＊＊#27.5±7.6 28.5±5.3

3.2 對大鼠心血管系統(tǒng)的作用 大鼠給藥前后不同時間的心率、收縮壓、舒張壓和心電圖之T波進行測定記錄。結果見表3～6。結果表明，一點紅水提物和醇提取物分別灌胃給予大鼠后，給藥前后的自身比較時都未見在心率、心電圖之T波、收縮壓和舒張壓方面有明顯差異。與對照組比較時，水提物和醇提物對心率、血壓均無明顯影響;但水提物大劑量給藥前，醇提物大小劑量組給藥前后多個時間點均有一定降低，可能是動物本身的個體差異所致。

3.3 對大鼠呼吸系統(tǒng)的影響 一點紅水提物和醇提取物給予大鼠前后，各組對大鼠呼吸頻率的作用見表7。從表中可見，在實驗劑量范圍內(nèi)，一點紅水、醇提取物經(jīng)給藥前后自身對照，未見明顯差異。與對照組的組間比較，一點紅水提物大劑量給藥前、2 h和3 h，醇提取物給藥前和給藥后10 min時對呼吸頻率有減少現(xiàn)象，說明在這些時間點有輕度抑制作用。

表3 對大鼠心率的影響( ± s，n=10)

表3 對大鼠心率的影響( ± s，n=10)

注:與給藥前比較，P＞0.05;與對照組比較，#P＜0.05。

組別 劑量/(g/kg) 給藥前 給藥后心率變化值/(次/min)10 min 0.5 h 1 h 2 h 3 h對照組453±38 444±39 480±52 459±23 469±29 468±30一點紅水提 2.5 450±20 449±37 447±29 422±59 453±65 444±60 5.0 447±43 460±16 430±36 435±18 434±44 450±60一點紅醇提 3.2 480±25 471±21 466±30 464±41 461±41 469±38 6.4 434±53 443±51 434±55 429±34 397±76 383±84

表4 對大鼠心電圖T波的影響( ± s，n=10)

表4 對大鼠心電圖T波的影響( ± s，n=10)

注:與給藥前比較，*P＜0.05;與對照組比較，#P＜0.05。

組別 劑量/(g/kg) 給藥前 給藥后不同時間T波值(uv)10 min 0.5 h 1 h 2 h 3 h對照組 144±61 144±61 160±36* 160±61*152±18 156±18一點紅水提 2.5 136±22 144±17 136±22 144±18 144±18 144±18 5.0 160±40# 152±17 160±28 152±33 152±66 160±75一點紅醇提 3.2 120±57# 128±17# 128±18# 112±18# 128±18# 120±28#6.4 120±57# 120±28# 128±18# 128±44# 136±61* 152±52*

表5 對大鼠收縮壓的影響(± s，n=10)

表5 對大鼠收縮壓的影響(± s，n=10)

注:與給藥前比較，P＞0.05;與對照組比較，#P＜0.05。

組別 劑量/(g/kg) 給藥前給藥后收縮壓/kPa 10 min 0.5 h 1 h 2 h 3 h對照組 15.2±2.1 14.9±0.6 14.5±2.2 14.2±2.2 13.9±2.1 14.4±2.2一點紅水提 2.5 14.2±1.4 14.8±0.3 13.3±2.0 14.0±0.9 13.5±1.4 13.9±1.1 5.0 16.1±2.4 15.8±0.6 15.4±1.1 16.0±2.6# 16.0±1.8# 16.8±2.1#一點紅醇提 3.2 15.2±1.2 14.9±1.2 13.6±2.0 13.6±14 13.6±0.9 13.8±9.0 6.4 14.1±1.2 13.3±3.3 13.3±1.4 13.6±1.2 13.3±1.9 13.6±2.0

表6 對大鼠舒張壓的影響(± s，n=10)

表6 對大鼠舒張壓的影響(± s，n=10)

注:與給藥前比較，P＞0.05;與對照組比較，#P＜0.05。

組別 劑量/(g/kg) 給藥前給藥后舒張壓/kPa 10 min 0.5 h 1 h 2 h 3 h對照組 11.6±1.8 11.2±1.1 10.8±1.7 10.6±1.7 11.6±1.7 10.6±1.7一點紅水提 2.5 10.9±1.3 10.9±1.2 10.8±0.4 10.9±0.8 10.8±1.8 10.4±0.8 5.0 11.8±1.1 11.7±0.8 11.6±1.1 11.8±2.2 11.0±1.6 11.3±1.8一點紅醇提 3.2 10.8±1.6 10.5±0.9 9.9±1.3 9.8±0.9 10.0±0.8 10.1±1.1 6.4 10.4±1.6 9.1±2.9 9.9±1.2 9.6±1.1 9.6±2.29.9±2.4

表7 對大鼠呼吸頻率的影響( ± s，n=10)

表7 對大鼠呼吸頻率的影響( ± s，n=10)

注:與給藥前比較，P＞0.05;與對照組比較，#P＜0.05。

組別 劑量/(g/kg) 給藥前 給藥后呼吸頻率/(次/min)10 min 0.5 h 1 h 2 h 3 h對照組81±19 80±7 80±4 86±12 92±28 84±21一點紅水提 2.5 86±15 80±15 75±19 78±22 80±22 78±21 5.0 71±10# 76±13 77±15 81±27 79±6# 78±10#一點紅醇提 3.2 73±14# 83±19 75±14 88±18 85±11 89±25 6.4 75±12 73±3#83±8 83±10 88±8 87±17

4 小結與討論

一般藥理學研究是指觀察主要藥效學以外的藥理作用，觀察神經(jīng)系統(tǒng)、呼吸系統(tǒng)、心血管系統(tǒng)三個方面，是新藥研究的重要內(nèi)容，為新藥用于臨床提供安全性依據(jù)［7］。本實驗研究結果表明，一點紅水提物在藥效學劑量對小鼠自主活動能力無明顯影響，對動物神經(jīng)系統(tǒng)無明顯影響;一點紅醇提物對小鼠自主活動有輕度抑制作用，具有一定鎮(zhèn)靜作用。一點紅水提物和醇提物對呼吸頻率在給藥前后比較及與對照組比較，差異均無顯著性(P＞0.05)，與對照組作組間比較時，一點紅水提物大劑量給藥前、2 h和3 h，醇提取物給藥前和給藥后10 min時對呼吸頻率有減少現(xiàn)象，說明在這些時間點有輕度抑制作用。一點紅水提物和醇提物對大鼠各用藥組心率、平均動脈收縮壓和舒張壓給藥前后比較差異均無顯著(P＞0.05)。與對照組比較時，水提物和醇提物對心率、血壓均無明顯影響;但水提物大劑量給藥前，醇提物大小劑量組給藥前后多個時間點對心電圖T波均有一定降低，可能是動物本身的個體差異所致。

綜上所述，在正常藥效劑量范圍內(nèi)，一點紅水提物對呼吸系統(tǒng)、心血管系統(tǒng)均無明顯影響，但醇提物有一定鎮(zhèn)靜作用。一點紅醇提物對心電圖T波和呼吸頻率有輕度抑制作用，提示在應用該藥材時需注意。本實驗為開發(fā)一點紅新藥提供了一定的一般藥理學依據(jù)。

［1］國家中醫(yī)藥管理局.中華本草［M］.上海:上?？茖W技術出版社，1999:6863.

［2］鐘正賢，周桂芬，陳學芬，等.一點紅提取物藥理作用的實驗研究［J］. 云南中醫(yī)中藥雜志，2006，27(4):36.

［3］鐘正賢，李開雙，李翠紅，等.一點紅藥理作用的實驗研究［J］. 中國中醫(yī)藥科技，2007，14(4):267.

［4］陳 奇主編.中藥藥理研究方法學［M］.北京:人民衛(wèi)生出版社，1993:669.

［5］朱 彬，李鳳新，郜 欣，等.虎杖總蒽醌提取物一般藥理學實驗研究［J］.東北師大學報自然科學版，2009，41(2):160.

［6］李 華，蒯正根，鄺荔香.藥用輔料殼聚糖的一般藥理學研究［J］.安徽醫(yī)藥，2004，8(2):95.

［7］中華人民共和國衛(wèi)生部藥政局.中藥新藥研究指南［M］.北京:人民衛(wèi)生出版社，1994:59.