付秋風 熊勇 孫麗萍 秦贇娜 于曉紅

（江西省婦幼保健院 南昌 330006）

子宮內膜癌是女性生殖道常見的惡性腫瘤之一，其發(fā)病率在世界范圍內呈上升趨勢，嚴重威脅婦女的健康。而腫瘤的浸潤和轉移與臨床的治療有著很大的關系。近年來研究表明，腫瘤基膜的完整與否和細胞外基質的降解情況是影響腫瘤細胞移動的關鍵環(huán)節(jié)，CD44（粘附分子）及其變異體與MMP9（基質金屬蛋白酶）在腫瘤的浸潤和轉移中起著重要作用。本文通過聯(lián)合檢測MMP9、CD44v6在子宮內膜癌中的表達，探討其與子宮內膜癌臨床病理特征的關系。

1 材料與方法

1.1 臨床資料 2004年1月～2005年8月在本院手術治療的患者，從中選取子宮內膜癌組織78例（根據FIGO分期標準，Ⅰ期48例，Ⅱ期13例，Ⅲ～Ⅳ期17例），其中子宮內膜腺癌59例、非子宮內膜腺癌19例。對每例的手術病理分期、組織學分級、肌層浸潤和淋巴結轉移予以登記。同時選取子宮內膜不典型增生組織30例、正常子宮內膜組織30例（增生期子宮內膜10例、分泌期子宮內膜10例、絕經期子宮內膜10例）作為對照組。所有患者術前均未行放、化療或激素治療。

1.2 染色方法 免疫組化采用Elivision plus試劑盒將多個抗鼠和抗兔的IgG分子與辣根過氧化物酶聚合，所形成的聚合物直接與一抗結合，從而放大了抗原抗體結合的信號。

1.3 結果判定 采用雙向評分：CD44v6和MMP-9均定位于細胞膜或細胞漿，按染色強度及陽性細胞所占百分比打分。癌細胞＜10%陽性0分，11%～40%1分，40%～70%2分，＞70%3分；顯色度計分：細胞無顯色0分，淺黃色1分，棕黃色2分，棕褐色3分。將兩分相加，0分為-，1～2分為+、3～4分為 ++，5～6分為 +++。

1.4 統(tǒng)計學處理 采用SPSS 10.0軟件分析系統(tǒng)，設計的兩樣本比較用秩和檢驗和χ2檢驗，P＜0.05為有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 CD44v6、MMP9在正常內膜、不典型增生內膜及子宮內膜癌中的表達 不典型增生內膜與正常內膜相比，CD44v6與MMP9陽性率有上升趨勢，但無統(tǒng)計意義（P＞0.05），正常內膜、不典型增生內膜與子宮內膜癌相比有顯著差異（P＜0.01）。見表1。

表1 CD44v6、MMP9在正常內膜、不典型增生內膜及子宮內膜癌中的表達 例

2.2 子宮內膜癌CD44v6、MMP9表達的臨床病理意義 CD44v6、MMP9的表達與子宮內膜癌病理分級、臨床分期、組織類型無關，與淋巴結轉移有關。見表2。

表2 子宮內膜癌MMP9、CD44v6表達的臨床病理意義 例（%）

2.3 CD44v6、MMP9的表達在子宮內膜癌中關系CD44v6、MMP9表達有明顯相關性，二者共同表達即顯示有較高的淋巴結轉移發(fā)生。見表3。

表3 MMP9、CD44v6的表達在子宮內膜癌中關系 例

3討論

子宮內膜癌是婦科常見的惡性腫瘤之一，浸潤和轉移是影響其預后的重要因素。近年來研究表明，表面粘附分子（CD44）和基質金屬蛋白酶（MMP）在浸潤和轉移中起著重要作用。CD44是腫瘤轉移中一個重要的粘附分子，是一種高度異質性跨膜單鏈糖蛋白，廣泛存在于淋巴細胞、成纖維細胞和上皮細胞中，由結締組織、內皮細胞、巨噬細胞、粒細胞、膠原細胞合成，參與細胞與細胞、細胞與基質之間的特異性粘附[1]，調節(jié)細胞的增殖與移動，參與淋巴細胞分化，活化成熟及“歸巢”以及促進血管生成。人類CD44基因定位于11號染色體短臂上，包含至少20個外顯子，外顯子按其轉錄片段是否參與拼接分為兩種：一種為標準CD44型（即CD44s），另一種為變異型 CD44（即 CD44v）。多種研究表明，CD44變異體的不同表達方式在多種腫瘤的轉移中起著重要作用，其中以CD44v6在腫瘤的侵襲轉移中關系密切，甚至認為CD44v6可作為腫瘤獨立的預后指標[2]。目前關于CD44v6定量與子宮內膜癌的關系尚存在爭議，Ayhan等[3]認為CD44v6表達與肌層浸潤深度、淋巴結轉移等不良預后因素呈負相關，CD44v6表達陰性患者有較高的復發(fā)率及較短的無瘤生存期。曲群等[4]則報道CD44v6在子宮內膜癌中表達率高達74%，與臨床分期和病理分級呈正相關，并隨腫瘤細胞侵襲肌層深度增加，陽性表達率增高。而Hoshimoto等[5]卻認為CD44v6的表達與臨床病理參數無相關性，腫瘤的浸潤轉移是個復雜的過程。

MMP則是降解細胞外基質和基底膜的主要酶類，是由結締組織、內皮細胞、巨噬細胞、粒細胞、膠原細胞合成和分泌，能分解纖維類膠原；同時也調控細胞外基質相關生長因子和細胞因子的分泌。哺乳動物中，迄今為止鑒定出24種MMP，各自降解不同的底物，MMP9是基質金屬蛋白酶家族成員之一，可降解細胞外多種基質成分，其中包括基底膜的主要成分Ⅳ型膠原。腫瘤細胞表達MMP9與其侵襲轉移能力有關，其過度表達與人類許多惡性腫瘤的浸潤轉移密切相關。Larlaro[6]甚至認為MMP9是子宮內膜中的主要金屬蛋白酶，其過度表達隨子宮內膜癌的手術病理分期的升高、肌層浸潤程度的加深、淋巴結的轉移而增強，但其高表達機制不清。YU等[7]在乳腺癌的實驗中發(fā)現CD44和MMP9有協(xié)同作用，認為CD44是MMP9在細胞表面的附著點，確保了CD44介導的腫瘤浸潤轉移的機制。

本研究結果顯示：MMP9、CD44v6的陽性表達與病理分級、臨床分期、肌層浸潤程度、組織型類別雖呈上升趨勢但無統(tǒng)計學意義，但在淋巴結轉移組中明顯高于無淋巴結轉移組，二者之間有顯著差義。表明通過聯(lián)合檢測MMP9、CD44v6在子宮內膜癌中的表達，可以預測轉移潛能判斷預后，為臨床進一步積極治療提供理論依據。

[1]Goodison S,Tarin D.Current status of CD44 variant isoforms as cancer diagnostic markers[J].Histopathology,1998,32（1）:1

[2]Amaguchi A,Goi T,Seki K,et al.Clinical significance of combined immunohistochemical detection of CD44v6 and sialyller expression for colorectal cancer patients undergoing carative resection[J].Oncologg,1998,55（5）:400-403

[3]Ayhan A,Tok EC,Bildiricil,et al.Over expression of CD44 Variant 6 in human endometrial cancer and its prognostic significance[J].Gynecol Oncol,2001,80（3）:355-358

[4]曲群,梁睿.CD44v6和Cd15s抗原在子宮內膜癌中的表達及臨床相關性研究[J].腫瘤防治雜志,2003,10（9）：940-942

[5]Hoshimoto K,Yanauchi N,Takazawa Y,et al.CD44 Variant 6 in endometrioid carcinoma ofthe uterus:its expression in the adenocarcinoma component is on independent prognostic marker[J].Pathol Res Pract,2003,199（2）:71-77

[6]Larlaro M,Loverro G,Vacca A,etal.Angiogenesisextentand expression of matrix metalloproteinase-2 and-9 correlate with upgrading and myometrial invasion in endometrial carcinoma[J].Eur J Clin lnvest,1999,29（9）:793-801

[7]Yu Q,Stamenkovic I.Localization of matrix mwtallo proteinase 9 to the cell surface provides a mechanism for CD44-mediated tumor invasion[J].Cenes,1999,13（1）:35