王一明 張海蘭 謝鵬貴 伊犁職業(yè)技術(shù)學(xué)院 835000

1 豬精子的特點(diǎn)

1.1 豬精液的理化特性

正常公豬的精液單次射精量為200-500m L，密度為2-3億/m L，顏色為乳白色或淺灰色，呈云霧狀，略帶腥味，PH值為7.0-7.5。

1.2 豬精子的形態(tài)和結(jié)構(gòu)

豬精子分頭部、頸部和尾部等三個(gè)主要部分，表面有質(zhì)膜覆蓋，是含有遺傳物質(zhì)并有活動(dòng)能力的雄配子。

（1）頭部

豬精子的頭主要由細(xì)胞核構(gòu)成，內(nèi)含遺傳物質(zhì)DNA。

（2）頸部

豬精子的頸部位于頭的基部，是頭和尾的連接部，也可作為精子頭的部分。精子尾部有纖絲在該部與頭相連接。頸部是精子最脆弱的部分，特別是精子在成熟、體外處理和保存過程中，某些不利因素的影響極易造成尾的脫離，形成無尾精子。

（3）尾部

精子最長的部分，是精子的代謝和運(yùn)動(dòng)器官。精子主要靠尾部的鞭索波動(dòng)推動(dòng)精子向前運(yùn)動(dòng)，由于精子能量來自尾的中段，頭部有缺陷或損傷的精子仍可有運(yùn)動(dòng)的能力。

（4）畸形率及畸形精子分類

畸形率是指異常精子的百分率，一般要求畸形率不超過18%，其測定可用普通顯微鏡,但需伊紅或姬姆沙染色,相差顯微鏡可直接觀察活精子的畸形率。公豬使用過頻或高溫環(huán)境會(huì)出現(xiàn)精子尾部帶有原生質(zhì)滴的畸形精子;畸形精子種類有很多,如巨型精子、短小精子、雙頭或雙尾精子、頂體膨脹或脫落、精子頭部殘缺或與尾部分離、尾部變曲。要求每頭公豬每2周檢查一次精子畸形率。

2 實(shí)驗(yàn)室精液質(zhì)量檢測指標(biāo)

2.1 感官檢測

（1）顏色

正常的精液是乳白色或淺灰色，呈云霧狀，精子密度越高，色澤愈濃，其透明度愈低。異常精液：如帶有綠色或黃色是混有膿液或尿液;帶有淺紅色或紅褐色是含有血液，表明精液中有炎癥物，這樣的精液應(yīng)舍棄不用，并會(huì)同獸醫(yī)尋找原應(yīng)，及時(shí)治療。

（2）氣味

正常豬精液略帶腥味，如果氣味異常，可能是混有尿液、膿液、糞渣或其他異物的表現(xiàn)，應(yīng)廢棄不用。氣味異常常伴有顏色的變化，因此可將色澤和氣味檢查結(jié)合進(jìn)行，使鑒定結(jié)果更為準(zhǔn)確。

（3）pH

以pH計(jì)或pH試紙測量。正常精液的pH值為7.0-7.5，呈中性或弱堿性。

（4）采精量的測定

測量精液量主要用電子天平稱量法。按1g=1m L計(jì)，精液量（g）=（精子的質(zhì)量+集精杯的質(zhì)量）-集精杯子的質(zhì)量。避免以量筒等轉(zhuǎn)移精液盛放容器的方法測量精液的體積，減少精子的死亡。

豬的射精量因品種、年齡、使用頻率不同有較大的差異，通常公豬的一次射精量為200-500m L。公豬射精過多或過少，應(yīng)分析原因。采精次數(shù)過多，公豬生殖機(jī)能衰退，日常管理不當(dāng)，采精技術(shù)不熟練均可能造成一次采精量過少；一次采精量過多則可能是由于混入過多的副性腺分泌物及尿液等。

2.2 顯微鏡檢測

（1）精子活率的檢測

精子的活率是指精液在37℃條件下呈直線運(yùn)動(dòng)的精子占全部精子總數(shù)的百分率，它與精子授精能力密切相關(guān)，是評(píng)定精液品質(zhì)的重要指標(biāo)。精子活率的評(píng)定一般用目測估測法在顯微鏡下觀察精子活率，按0.1-1.0的十級(jí)評(píng)分法進(jìn)行評(píng)估。檢查活率時(shí)應(yīng)在37℃條件下進(jìn)行。

（2）精子密度檢查

精子密度值即每毫升精液中含有的精子數(shù)量，是確定精液稀釋倍數(shù)、評(píng)定精液品質(zhì)的一個(gè)重要指標(biāo)，正常公豬的精子密度為2-3億／m L，有的可高達(dá)5億/m L。檢測精子密度的方法主要有估測法、精子密度儀法、血細(xì)胞計(jì)數(shù)方法等。

①估測法

在顯微鏡下觀察精子的分布，精子與精子之間的距離少于一個(gè)精子長度為“密”，其距離相當(dāng)于一個(gè)精子的長度為“中”，其距離大于一個(gè)精子的長度為“稀”。此種方法主觀性強(qiáng)，誤差大，只能進(jìn)行粗略的估計(jì)。

②血細(xì)胞計(jì)數(shù)方法

該方法最準(zhǔn)確，但速度太慢，生產(chǎn)實(shí)踐中主要用于校正精子密度儀的讀數(shù)。

血細(xì)胞計(jì)數(shù)方法：①以微量加樣器取具有代表性原精液200μ1，用3%Nac1稀釋10倍；②在血細(xì)胞計(jì)數(shù)板上放一塊蓋玻片，取一滴稀釋液后精液置于計(jì)數(shù)板的槽中，靠虹吸將精液吸入計(jì)數(shù)室內(nèi)；③在高倍鏡下計(jì)數(shù)5個(gè)中方格內(nèi)的精子總數(shù)，將該數(shù)乘以50萬，即得原精液每毫升的精子數(shù)（即精液密度）。

（3）精子畸形率檢測

精子畸形率的大小對(duì)精子的受精能力存在一定的影響。先前的研究指出，精液中畸形的精子比率過高將會(huì)減少精液的受精能力，但對(duì)于畸形率過高的精液通過增加精液的用量也可以提高其受精效果。

精子畸形率的測定可以用伊紅或姬姆薩等染料對(duì)精子進(jìn)行染色后用普通顯微鏡觀察，或者用相差顯微鏡直接觀察或精子的畸形率。

3 精液體外處理過程中的注意事項(xiàng)

3.1 精液稀釋注意事項(xiàng)

（1）稀釋液在精液稀釋前1-2h配置，均勻攪拌，再過濾一次，密封，置于37℃恒溫水浴箱中。在精液稀釋前幾分鐘添加抗生素，太早易失效。

（2）精液稀釋要求與精液直接接觸的器材，用蒸餾水清洗并進(jìn)行高溫消毒。

（3）精液稀釋要在25℃的恒溫室內(nèi)進(jìn)行，新鮮精液未經(jīng)品質(zhì)檢查或檢查不合格 （直線運(yùn)動(dòng)活率＜0.7，區(qū)別于活力）的精液不能稀釋。

（4）新鮮精液采集后應(yīng)盡快稀釋，原精貯存時(shí)間不宜超過3m in。

（5）稀釋時(shí)嚴(yán)禁太陽光照射精液，應(yīng)處于暗處操作。

（6）精液要求等溫稀釋。精液與稀釋液的溫差不能超過1℃，以精液溫度為標(biāo)準(zhǔn)，來調(diào)節(jié)稀釋液的溫度。

（7）稀釋時(shí)，將稀釋液沿杯（瓶）壁緩慢加入到精液中，然后輕輕搖動(dòng)或用消毒玻璃棒沿一個(gè)方向緩慢攪拌，使其混合均勻。

（8）高倍稀釋時(shí)，應(yīng)先進(jìn)行低倍稀釋（1：1-2），稍待片刻后將余下的稀釋液沿壁緩慢加入，以防造成“稀釋打擊”。

（9）稀釋倍數(shù)的確定：精液稀釋的比例應(yīng)根據(jù)原精液的品質(zhì)、輸精量、配種母豬頭數(shù)以及是否需要運(yùn)輸和貯存而定。一般以每個(gè)輸精計(jì)量含有效精子數(shù)40億以上，輸精量為80-100m L來確定稀釋倍數(shù)。

（10）稀釋后要求靜置片刻再作精子活率檢查。如果稀釋前后精子活率無太大變化，即可進(jìn)行分裝與保存；如果活率下降過快，說明稀釋液的配置或稀釋操作有問題，不宜使用，并應(yīng)查明原因加以改進(jìn)。

3.2 精液保存注意事項(xiàng)

（1）將分裝完的精液置22-25℃的室溫1-2h后，放入17℃恒溫箱貯存，也可以將精液瓶用幾層紗布或干毛巾包好后直接放置于17℃恒溫箱中，讓其溫度緩慢下降，避免因溫度下降過快造成死精子數(shù)增多等。

（2）保存過程中要求每12h將精液搖勻一次，防止精子沉淀而引起死亡。每次搖勻時(shí)動(dòng)作要輕緩均勻，同時(shí)觀察精液的色澤狀態(tài)，并做好記錄，發(fā)現(xiàn)異常及時(shí)處理。

（3）保存過程中要切實(shí)注意冰箱內(nèi)溫度的變化（通過溫度計(jì)的顯示），以免因意想不到的原因而造成電壓不穩(wěn)而導(dǎo)致溫度升高或降低。

（4）盡量減少精液保存箱開關(guān)次數(shù)，以減少對(duì)精子的影響。

（5）使用前對(duì)保存的精液進(jìn)行活率檢查，活率＜0.6的精液應(yīng)棄之不用。

（6）用短效稀釋液稀釋的精液可保存3天，中效稀釋液可保存4-6天，用長效稀釋液稀釋的精液可保存7天以上。但無論何種稀釋液保存精液，都應(yīng)盡快用完，否則會(huì)影響使用效果。

3.3 精液運(yùn)輸應(yīng)注意的事項(xiàng)

（1）精液在運(yùn)輸前必須經(jīng)過嚴(yán)格的檢查，活率＜0.7的精液嚴(yán)禁調(diào)出。

（2）包裝瓶或包裝袋中應(yīng)盡量排出空氣，以減少在運(yùn)輸過程中的震蕩。

（3）在運(yùn)輸過程中，應(yīng)嚴(yán)格避光。

（4）精液運(yùn)輸?shù)竭_(dá)目的地后，檢查精子活率，合格后方可接收。

4 小結(jié)

精子檢測的主要目的就是快速、準(zhǔn)確地確定其精液活率，以滿足生產(chǎn)的需要。利用目測及光學(xué)顯微鏡來評(píng)價(jià)精液的常規(guī)指標(biāo)，保證了輸精質(zhì)量，減少了因精液質(zhì)量差而引起的空懷；反映了種公豬精液品質(zhì)的好壞，精液品質(zhì)好的就充分發(fā)揮其遺傳潛力，反之做以治療或淘汰，從而減少成本，減少母豬返情，提高受胎率和產(chǎn)仔數(shù)等。

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