高 旭，李麗芬，劉斌鈺

(山西大同大學(xué)醫(yī)學(xué)院，山西 大同 037009)

黃芪為一種扶正固本的臨床常用中藥,中國(guó)藥典規(guī)定,藥用黃芪為豆科植物蒙古黃芪或膜莢黃芪的干燥根.黃芪味甘、性溫，有補(bǔ)氣升陽(yáng)、固表止汗、脫毒排膿和生肌等功效[1].近年來(lái)研究發(fā)現(xiàn)，黃芪中除黃芪甲甙、黃酮等小分子化合物具有較強(qiáng)的生物活性外，大分子化合物如黃芪多糖 (Astrgalus Polysaccharides APS)也同樣具有多方面的活性，其利用價(jià)值日益受到重視.黃芪多糖是一種具有代表性的大分子多糖，由葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖等組成.現(xiàn)代藥理學(xué)研究表明，黃芪多糖能增加超氧化物歧化酶(SOD)活性、降低丙二醛(MDA)含量，具有延緩衰老[2]、雙向調(diào)節(jié)血糖、保護(hù)腎臟[3-5]、增強(qiáng)耐力[6]減輕心肌損傷[7]等作用，本實(shí)驗(yàn)旨在探討黃芪多糖對(duì)小鼠免疫功能及血常規(guī)的影響,為臨床應(yīng)用提供理論基礎(chǔ)和實(shí)驗(yàn)依據(jù).

1 材料

1.1 試驗(yàn)藥物

黃芪多糖購(gòu)于陜西寶雞方晟生物開(kāi)發(fā)有限公司，用前配成所需濃度.

1.2 動(dòng)物

昆明種小白鼠，♀♂皆用，由山西大同大學(xué)動(dòng)物室提供.

2 方法

2.1 黃芪多糖對(duì)小白鼠生長(zhǎng)情況及對(duì)血常規(guī)的影響

實(shí)驗(yàn)取體重20 g左右小白鼠30只，隨機(jī)分為3組，黃芪多糖大、小劑量組和生理鹽水組，黃芪多糖大、小劑量組分別灌胃黃芪多糖150 mg·kg-1.d-1，50 mg·kg-1·d-1，對(duì)照組灌胃等劑量的生理鹽水，連續(xù)7 d.在末次給藥后2 h從小鼠尾部取血檢測(cè)血常規(guī).實(shí)驗(yàn)參照文獻(xiàn)[8]進(jìn)行.

2.2 黃芪多糖對(duì)小白鼠免疫器官重量的影響

實(shí)驗(yàn)取體重10～12 g幼鼠30只，隨機(jī)分為3組，黃芪多糖大、小劑量組和對(duì)照組(簡(jiǎn)稱A、B、C組)，給藥劑量同上，連續(xù)10 d，在末次給藥后2 h處死小鼠，分別稱取體重、胸腺和脾臟的質(zhì)量，以胸腺、脾臟的質(zhì)量(mg)與體質(zhì)量(g)之比作為胸腺、脾臟的指數(shù).實(shí)驗(yàn)參照文獻(xiàn)[9]進(jìn)行.

2.3 黃芪多糖對(duì)小白鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬功能的影響

實(shí)驗(yàn)取體重22～24 g小白鼠30只，隨機(jī)分為3組，黃芪多糖大、小劑量組和生理鹽水組，給藥劑量同上，連續(xù)7 d.在末次給藥后1 h每只小鼠腹腔注射5%的可溶性滅菌淀粉1 mL，24 h后再次腹腔注射5% 雞紅細(xì)胞生理鹽水懸液0.5 mL，30 min后處死動(dòng)物，打開(kāi)腹腔作腹腔液涂片，“瑞氏”染液染色，鏡下觀察并計(jì)算巨噬細(xì)胞吞噬百分率及吞噬指數(shù)[10].

吞噬百分率=具有吞噬能力的巨噬細(xì)胞數(shù)/巨噬細(xì)胞觀察數(shù)×100%

吞噬指數(shù)=吞噬的雞紅細(xì)胞總數(shù)/巨噬細(xì)胞觀察數(shù)×100%

2.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

3 結(jié)果

3.1 肉眼觀察動(dòng)物生長(zhǎng)情況及對(duì)血常規(guī)的影響

服用黃芪多糖組小鼠(A、B組)比對(duì)照組(C組)小鼠個(gè)頭大、粗壯，毛順而光亮，非常活潑，體格健壯，活動(dòng)度與進(jìn)食增加，血常規(guī)及血紅蛋白檢測(cè)結(jié)果見(jiàn)表1.

表1 黃芪多糖對(duì)小白鼠血常規(guī)和血紅蛋白的影響n=10()

表1 黃芪多糖對(duì)小白鼠血常規(guī)和血紅蛋白的影響n=10()

注：與對(duì)照組相比 *P ＜ 0.05，**P ＜ 0.01

組別 RBC/(1012·L-1) Hb/(g·L-1) WBC/(109·L-1) LC/% 中性粒細(xì)胞/% 單核細(xì)胞/%A 組 7.39±0.46** 138±12 1.73±0.41** 74.1±7.9** 35±8.3 0.8±0.3 B 組 7.14±0.52* 131±15 1.55±0.37* 71.5±6.8* 32±7.5 0.7±0.6 C 組 6.58±0.34 127±14 1.08±0.34 62.3±7.4 34±8.9 0.9±0.5

從表1可見(jiàn)，黃芪多糖可以使紅細(xì)胞、白細(xì)胞和淋巴細(xì)胞增加，與對(duì)照組比較有顯著性差異，血紅蛋白、中性粒細(xì)胞及單核細(xì)胞與對(duì)照組比較無(wú)顯著性差異.

3.2 黃芪多糖對(duì)小白鼠免疫器官重量的影響

實(shí)驗(yàn)計(jì)算幼鼠的胸腺和脾臟的指數(shù)，結(jié)果見(jiàn)表2.

表2 黃芪多糖對(duì)小白鼠免疫器官重量的影響(n=10)

從表2可見(jiàn)黃芪多糖能促進(jìn)正常小鼠胸腺和脾臟重量的增加，經(jīng)單因素方差分析，與對(duì)照組比較有顯著性差異.

3.3 黃芪多糖對(duì)小白鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬功能的影響

實(shí)驗(yàn)分組與給藥劑量同上，連續(xù)7 d，常規(guī)染色，鏡下觀察，結(jié)果見(jiàn)表3、圖1，均為HE染色×400倍.

表3 黃芪多糖對(duì)小白鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬功能的影響(n=10)

從表3可見(jiàn)，黃芪多糖能增強(qiáng)小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬百分率，并且使吞噬指數(shù)提高，黃芪多糖大劑量組的作用明顯強(qiáng)于小劑量組.經(jīng)單因素方差分析，組間比較，黃芪多糖大、小劑量組與對(duì)照組比較有顯著性差異.從圖1可見(jiàn)，對(duì)照組的巨噬細(xì)胞吞噬的雞紅細(xì)胞很少，而黃芪多糖大、小劑量組的巨噬細(xì)胞吞噬的雞紅細(xì)胞很多.

圖1 黃芪多糖對(duì)小白鼠巨噬細(xì)胞吞噬的雞紅細(xì)胞的影響

4 討論

30多年前，人們對(duì)中草藥免疫藥理進(jìn)行研究時(shí)發(fā)現(xiàn)，許多補(bǔ)益類中藥的活性成分是以多糖的形式存在.大量的實(shí)驗(yàn)研究證明多糖對(duì)機(jī)體特異性免疫與非特異性免疫、細(xì)胞免疫與體液免疫有廣泛的影響[11].多糖可分為植物性多糖、動(dòng)物性多糖、微生物多糖和海藻多糖四類.黃芪多糖屬于植物性多糖.

目前認(rèn)為，中藥及中藥提取物本身并沒(méi)有抗菌或抗病毒的作用，而是通過(guò)提高機(jī)體免疫力，從而起到增強(qiáng)機(jī)體抗炎和抗病毒的效應(yīng).由于體內(nèi)的免疫細(xì)胞大多分布在胸腺和脾臟中，所以胸腺和脾臟是動(dòng)物的重要免疫器官.一般胸腺在動(dòng)物生長(zhǎng)到一定時(shí)候就萎縮了，所以必須選擇幼鼠來(lái)觀察胸腺，胸腺的免疫功能主要是誘導(dǎo)T細(xì)胞的分化和成熟，輔助T細(xì)胞產(chǎn)生抗體；動(dòng)物成熟后脾臟就成為其最大的免疫器官，內(nèi)含大量的免疫細(xì)胞，其中T淋巴細(xì)胞約占40%左右，B淋巴細(xì)胞約占60%左右，在體液免疫中的地位極其重要[12].因此研究黃芪多糖對(duì)機(jī)體免疫器官的作用是研究多糖免疫調(diào)節(jié)作用的一個(gè)重要方面.胸腺和脾臟與免疫的產(chǎn)生密切相關(guān)，若指數(shù)都增加，說(shuō)明對(duì)細(xì)胞免疫和體液免疫都有促進(jìn)作用，相對(duì)地表明機(jī)體免疫功能增強(qiáng).因此測(cè)定動(dòng)物胸腺和脾臟重量指數(shù)能反映機(jī)體免疫力.巨噬細(xì)胞是一種非特異性免疫細(xì)胞，它能吞噬和消滅外來(lái)異物和自身死亡細(xì)胞.小鼠黃芪多糖灌胃10 d后，紅細(xì)胞、白細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、吞噬率和吞噬指數(shù)與對(duì)照組比較均有顯著性差異.由此表明黃芪多糖能明顯提高巨噬細(xì)胞吞噬雞紅細(xì)胞的吞噬率和吞噬指數(shù).

已知機(jī)體的衰老不僅出現(xiàn)易疲勞、免疫功能低下的反應(yīng)，而且還伴有外觀行為的變化，從而出現(xiàn)了臨床年邁體衰病多的現(xiàn)象.如果設(shè)法增強(qiáng)機(jī)體的免疫功能、應(yīng)激能力和耐力，將有助于延緩衰老過(guò)程和老年病的防治.隨著對(duì)祖國(guó)傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)研究的不斷深入，越來(lái)越多的中草藥及中草藥提取物的應(yīng)用得到了大家的重視，特別是中藥多糖的應(yīng)用，必將在醫(yī)療方面為人民提供新的視野和方法.

綜上所述，黃芪多糖能提高小鼠紅細(xì)胞、白細(xì)胞和淋巴細(xì)胞數(shù)量，促進(jìn)正常小鼠胸腺和脾臟重量的增加，增強(qiáng)小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬百分率，并且使吞噬指數(shù)提高.本實(shí)驗(yàn)揭示黃芪多糖延緩衰老的作用可能是通過(guò)增強(qiáng)機(jī)體免疫功能來(lái)實(shí)現(xiàn)的.

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