田 露，鄭文宏，湯 萌，彭玉林

(江西省景德鎮(zhèn)市第三人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，江西 景德鎮(zhèn) 333001)

鐵染色是骨髓細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢查常用的細(xì)胞化學(xué)染色方法之一，它反映機(jī)體內(nèi)鐵的儲存和利用情況，用于診斷和鑒別缺鐵性貧血、非缺鐵性貧血、鐵粒幼細(xì)胞性貧血等。鐵染色原理是正常人骨髓中的儲存鐵主要存在于骨髓小粒和幼紅細(xì)胞中，骨髓中的鐵在酸性環(huán)境下與亞鐵氰化鉀作用，形成普魯士藍(lán)色的亞鐵氰化鐵沉淀，定位于含鐵的部位[2]。本文就鐵染色的兩種方法進(jìn)行比較，使染色步驟更簡單、更安全。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 常規(guī)染色液 臨用時，在試管內(nèi)先放200g/L亞鐵氰化鉀5ml，再將濃鹽酸慢慢滴入，邊滴邊搖，直到出現(xiàn)白色沉淀為止，然后再滴入亞鐵氰化鉀至白色沉淀消失為止[4]。

1.1.2 簡易染色液 臨用時，將20g/L亞鐵氰化鉀與2%鹽酸等量混合配成酸性亞鐵氰化鉀溶液。

1.1.3 選取40份2009年以來含有骨髓小粒的標(biāo)本，每份2張。

1.2 染色方法 (1)一張骨髓片用甲醇固定10min，另一張不用固定。(2)已固定的骨髓片用常規(guī)新鮮配制的染色液覆蓋其上，未固定的用簡易染色液覆蓋其上，同時染色30min。(3)流水緩慢沖洗1min，晾干。(4)用0.2%核固紅復(fù)染1min。(5)用流水沖洗，晾干，鏡檢[1]。(6)觀察細(xì)胞外鐵的陽性強(qiáng)弱和細(xì)胞內(nèi)鐵即鐵粒幼紅細(xì)胞的百分率。對兩種染色方法進(jìn)行比較。

1.3 統(tǒng)計學(xué)分析 采用配對t檢驗(yàn)方法對檢驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行分析

2 結(jié)果

細(xì)胞外鐵：40份標(biāo)本結(jié)果完全一致，兩種染色方法結(jié)果無差異。

細(xì)胞內(nèi)鐵：兩種染色方法中有核紅細(xì)胞鐵粒幼細(xì)胞陽性百分率，經(jīng)配對 t檢驗(yàn)分析，得 t=0.512，查 t值表，P＞0.05，結(jié)果無顯著差異，兩種染色方法效果一致。見表1。

表1 兩種骨髓鐵染色方法鐵粒幼紅細(xì)胞百分率結(jié)果

3 討論

常規(guī)染色方法中骨髓片都要用甲醇固定，是為了防止有核細(xì)胞形態(tài)的溶解、破壞。本試驗(yàn)證明未用甲醇固定的骨髓片，其成熟紅細(xì)胞和有核細(xì)胞形態(tài)完整，結(jié)構(gòu)清晰，可以省去甲醇固定步驟，使染色方法更簡單省時、省試劑。

酸性亞鐵氰化鉀不穩(wěn)定，易被氧化成絡(luò)合物的配位體發(fā)生改變而失效，因此，要求臨用時新鮮配制。常用染色液中的200g/L亞鐵氰化鉀溶液，配制時不易溶解，而且需要量大，濃鹽酸有強(qiáng)腐蝕性，用濃鹽酸與亞鐵氰化鉀混合時易因放熱反應(yīng)而引起試管爆炸，發(fā)生危險。簡易染色液中的20g/L亞鐵氰化鉀溶液溶度低，易配制，2%的鹽酸是稀酸，使用安全。

我國貧血的發(fā)病率高達(dá)20.1%，大部分為缺鐵性貧血，骨髓鐵染色簡易方法染色效果好，具有簡單省時、省試劑，安全的優(yōu)點(diǎn)，適合臨床工作的需要。

[1]葉應(yīng)嫵,王毓三,申子瑜,主編.全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程[M].第3版.南京:東南大學(xué)出版社,2006:162-162.

[2]許文榮,王建中主編.臨床血液學(xué)與檢驗(yàn)[M].第4版.北京:人民衛(wèi)生出版社,2009:75-75.

[3]王宏梅,李福德,姜永芳,等.臨床血液學(xué)雜志[J].2008,21(7):377-378.

[4]劉志潔,黃文源主編.實(shí)用臨床血液細(xì)胞學(xué)圖譜[M].北京:科學(xué)出版社,1996:25-26.