邵耀東,逄樹君,楊振華,張 鳳,徐 峰

(1.青島康地恩藥業(yè)有限公司,山東青島 266111;2.青島六和藥業(yè)有限公司,山東青島 266111)

紫外分光光度法測(cè)定鹽酸沙拉沙星可溶性粉中沙拉沙星方法的建立*

邵耀東1,2,逄樹君1,楊振華1,張 鳳1,徐 峰2

(1.青島康地恩藥業(yè)有限公司,山東青島 266111;2.青島六和藥業(yè)有限公司,山東青島 266111)

為了快捷簡(jiǎn)便地測(cè)定鹽酸沙拉沙星可溶性粉生產(chǎn)過(guò)程中沙拉沙星的含量,采用紫外分光光度法測(cè)定沙拉沙星的含量。結(jié)果表明,沙拉沙星對(duì)照品質(zhì)量濃度在2.4 μ g/mL～12.0 μ g/mL范圍內(nèi)與吸收度呈良好的線性關(guān)系,線性回歸方程A=0.088C+0.09,r=0.999 9(n=5),平均回收率為99.74%,RSD=0.47%(n=5),與高效液相色譜法比較結(jié)果一致。

鹽酸沙拉沙星可溶性粉;含量測(cè)定;紫外分光光度法

沙拉沙星是動(dòng)物專用的氟喹諾酮類藥物,藥用其鹽酸鹽,作用于各種革蘭陰性菌和革蘭陽(yáng)性菌。鹽酸沙拉沙星可溶性粉用途廣泛,主要用于雞細(xì)菌性和支原體感染性疾病,如雞的大腸埃希菌病、沙門菌病、巴氏桿菌病、支原體病和葡萄球菌感染等[1-4]。在農(nóng)業(yè)部《獸藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)》2003年版[5]中“鹽酸沙拉沙星可溶性粉”含量測(cè)定是用高效液相色譜法,該方法專屬性強(qiáng),測(cè)量準(zhǔn)確度高,但是費(fèi)時(shí)、操作繁瑣、技術(shù)性較高。紫外分光光度法測(cè)定鹽酸沙拉沙星可溶性粉的含量操作簡(jiǎn)單、快速,可以用于鹽酸沙拉沙星可溶性粉生產(chǎn)過(guò)程中半成品含量的控制。筆者參照其他喹諾酮類藥物制劑含量測(cè)定方法[6-13],建立了紫外分光光度法測(cè)定鹽酸沙拉沙星可溶性粉含量的方法,現(xiàn)報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 儀器 UV-2450型紫外分光光度儀為日本島津公司生產(chǎn)品;AG285分析天平為瑞士梅特勒-托利多公司產(chǎn)品。

1.1.2 藥品 沙拉沙星對(duì)照品為中國(guó)獸醫(yī)藥品監(jiān)察所產(chǎn)品,批號(hào)為 H0180802,含量 99.6%;鹽酸沙拉沙星可溶性粉(5%)為青島六和藥業(yè)有限公司產(chǎn)品,批號(hào)為 2008102101,2008102601,2008110301,2008111201,2008112001;水為純化水;其他試劑均為分析純。

1.2 方法

1.2.1 檢測(cè)波長(zhǎng)的選擇 取沙拉沙星對(duì)照品適量,精密稱重,加0.1 mol/L氫氧化鈉溶液溶解,并稀釋成每1 mL中含5 μ g的溶液,按同法配制不含沙拉沙星的樣品溶液作為陰性對(duì)照溶液,以0.1 mol/L氫氧化鈉溶液為空白對(duì)照,在250 nm～350 nm波長(zhǎng)范圍內(nèi)進(jìn)行掃描,確定其最大吸收波長(zhǎng)即為測(cè)定波長(zhǎng)。

1.2.2 線性關(guān)系考察 精密稱取沙拉沙星對(duì)照品適量,加0.1 mol/L氫氧化鈉溶液溶解并稀釋成60 μ g/mL的對(duì)照品貯備液;精密量取該溶液1.0,2.0,3.0,4.0,5.0 mL,分別置于25 mL容量瓶中,加0.1 mol/L氫氧化鈉溶液定容,搖勻,制成 2.4、4.8、7.2 、9.6、12.0 μ g/mL 的溶液 ,以 0.1 mol/L 氫氧化鈉溶液作為空白,在確定的吸收波長(zhǎng)處測(cè)定吸收度,以吸收度(A)對(duì)質(zhì)量濃度(C,μ g/mL)進(jìn)行線性回歸。

1.2.3 穩(wěn)定性試驗(yàn) 精密稱取鹽酸沙拉沙星可溶性粉(批號(hào)為2008102101)適量,加 0.1 mol/L氫氧化鈉溶液溶解并稀釋成含沙拉沙星5 μ g/mL的溶液,搖勻。分別于 0、10、20 、30、40 min 時(shí),在確定的吸收波長(zhǎng)處測(cè)定其吸收度。

1.2.4 重現(xiàn)性試驗(yàn) 精密稱取鹽酸沙拉沙星可溶性粉(批號(hào)為2008102601)5份,分別加0.1 mol/L氫氧化鈉溶液溶解并稀釋成約含沙拉沙星5 μ g/mL的溶液,以0.1 mol/L氫氧化鈉溶液為空白溶液,在確定的吸收波長(zhǎng)處測(cè)定其吸收度,另取沙拉沙星對(duì)照品,同法測(cè)定,根據(jù)兩者吸收度的比值計(jì)算沙拉沙星含量。

1.2.5 加樣回收試驗(yàn) 取已知質(zhì)量濃度的供試品(批號(hào)為20071228-5)溶液,分為 5份,分別精密加入沙拉沙星對(duì)照品溶液(2.10 μ g?mL-1)1.0、2.0、3.0、4.0、5.0 mL,制備待測(cè)溶液,并測(cè)定沙拉沙星含量。

1.2.6 樣品含量測(cè)定

1.2.6.1 高效液相色譜法(HPLC) 按照農(nóng)業(yè)部《獸藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)》2003年版方法測(cè)定鹽酸沙拉沙星可溶性粉中沙拉沙星的含量。

1.2.6.2 紫外分光光度法(UV) 取鹽酸沙拉沙星可溶性粉適量(相當(dāng)于沙拉沙星10 mg),精密稱定,用0.1 mol/L氫氧化鈉溶液溶解并稀釋成100 mL,制成 100 μ g/mL的溶液,精密吸取 5 mL,置于100 mL容量瓶中,用0.1 mol/L氫氧化鈉溶液稀釋至刻度,制成含沙拉沙星 5 μ g/mL的溶液,以0.1 mol/L氫氧化鈉溶液為空白溶液,在確定的吸收波長(zhǎng)處測(cè)定吸收度,另取沙拉沙星對(duì)照品,同法測(cè)定,根據(jù)兩者吸收度的比值計(jì)算沙拉沙星含量。

圖1 沙拉沙星紫外吸收?qǐng)D譜Fig.1 UV absorption of sarafloxacin

2 結(jié)果

2.1 檢測(cè)波長(zhǎng)的選擇

沙拉沙星紫外吸收?qǐng)D譜見圖1,由圖1可見,沙拉沙星在274、323、334 nm波長(zhǎng)處有最大吸收。其中274 nm波長(zhǎng)處沙拉沙星有理想的吸收度,而陰性對(duì)照溶液在此處無(wú)吸收,故選擇274 nm為測(cè)定波長(zhǎng)。

2.2 線性關(guān)系考察

按“1.2.2”項(xiàng)下方法,以吸收度(A)對(duì)質(zhì)量濃度(C,μ g?mL-1)進(jìn)行線性回歸,得回歸方程 A=0.088C+0.09,r=0.999 9(n=5)(圖2)。結(jié)果表明沙拉沙星質(zhì)量濃度在 2.4 μ g/mL～12.0 μ g/mL范圍內(nèi)與吸收度線性關(guān)系良好。

圖2 沙拉沙星線性關(guān)系圖Fig.2 Linear relation of sarafloxacin

2.3 穩(wěn)定性試驗(yàn)

按“1.2.3”項(xiàng)下方法得出,沙拉沙星吸收度的RSD為0.46%(n=5),表明樣品溶液在該體系下穩(wěn)定。

2.4 重現(xiàn)性試驗(yàn)

按“1.2.4”項(xiàng)下方法得出,其含量的 RSD為0.48%(n=5),表明方法重現(xiàn)性良好。

2.5 加樣回收試驗(yàn)

按“1.2.5”項(xiàng)下方法,由表1結(jié)果可得出該方法加樣回收率較高。

2.6 兩種含量測(cè)定方法測(cè)定結(jié)果

按“1.2.6”方法,由表2結(jié)果可得出兩種方法測(cè)定結(jié)果是一致的。

表1 加樣回收試驗(yàn)結(jié)果Table 1 Results of recovery tests

表2 含量測(cè)定結(jié)果百分率比較Table 2 Comparison of detection results %

3 討論

本文所建立的紫外分光光度法測(cè)定鹽酸沙拉沙星可溶性粉中沙拉沙星的含量,選用的試劑、儀器等都較陳玉梅等[14]、傅麗等[15-16]簡(jiǎn)單,該方法更方便,通過(guò)對(duì)該方法的線性關(guān)系考察、穩(wěn)定性試驗(yàn)、重現(xiàn)性試驗(yàn)、加樣回收試驗(yàn)等一系列試驗(yàn),結(jié)果顯示,該方法穩(wěn)定、重現(xiàn)性較好?？梢詫⒃摲椒ㄗ鳛辂}酸沙拉沙星可溶性粉生產(chǎn)過(guò)程中的含量控制測(cè)定。因?yàn)槲覈?guó)農(nóng)業(yè)部《獸藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)》2003年版中鹽酸沙拉沙星可溶性粉含量測(cè)定方法為高效液相色譜法[5],所以在鹽酸沙拉沙星可溶性粉成品檢測(cè)含量時(shí)最好使用高效液相色譜法。

紫外分光光度法測(cè)定鹽酸沙拉沙星可溶性粉中沙拉沙星含量時(shí),通過(guò)線性關(guān)系圖可知質(zhì)量濃度在2.4 μ g/m ～ 12.0 μ g/mL 范圍內(nèi)都有良好的線性關(guān)系,但是當(dāng)質(zhì)量濃度大于 8.0 μ g/mL時(shí),其吸收度超過(guò)了0.7。因?yàn)槭褂米贤夥止夤舛确〞r(shí)紫外吸收度在0.2～0.7范圍內(nèi)是精確度是最高的,所以使用該方法測(cè)定沙拉沙星含量時(shí)最好將其質(zhì)量濃度控制在 2.4 μ g/mL ～ 8.0 μ g/mL 范圍內(nèi)測(cè)定 。

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Determination of Sarafloxacin in Sarafloxacin Hydrochloride Soluble Powder by UV Spectrophotometry

SHAO Yao-dong1,2,PANG Shu-jun1,YANG Zhen-hua1,ZHANG Feng1,XU Feng2

(1.Qingdao Continent Pharmaceutical Co.,Ltd,Qingdao,Shandong,266111,China;2.Qingdao Liuhe Pharmaceutical Co.,Ltd,Qingdao,Shandong,266111,China)

In order to control the sarafloxacin content in soluble powder in process easily and quickly,UV spectrophotometry was developed referring to the analysis methods of other quinolone preparations.The calibration curve for sarafloxacin was in good linearity with the range of 2.4 μ g/mL-12.0 μ g/mL with the regression equation A=0.088C+0.09,r=0.999 9(n=5).The average recovery rate was 99.74%,RSD=0.47%(n=5).The results gotten by UV method were closed to those by HPLC.

sarafloxacin hydrochloride soluble powder;content determination;UV spectrophotometry

S859.796

A

1007-5038(2010)03-0068-03

2009-10-10

邵耀東(1979-),男,山東菏澤人,獸醫(yī)師,主要從事獸藥質(zhì)量技術(shù)管理工作。