張 琳

(鄭州大學第五附屬醫(yī)院檢驗科,河南鄭州450052)

乙型肝炎是一種嚴重危害我國人們健康的傳染病。以往臨床上往往通過乙型肝炎病毒標志物(HBV M)和HBV DNA的檢測結果來指導診斷和治療。近年來研究發(fā)現(xiàn)HBV外膜蛋白前S1抗原(Pre-S1Ag)、前S2抗原(Pre-S2Ag)對乙肝臨床診斷具有一定的臨床意義。本文通過對300例乙肝患者血清Pre-S1Ag、Pre-S2Ag、HBV DNA及肝功能的檢測,并將結果進行比較和分析,來探討聯(lián)合檢測Pre-S1Ag、Pre-S2Ag在乙肝的感染、復制以及對肝功能的影響的臨床意義。

1 材料與方法

1.1 臨床樣本 300例乙型肝炎患者均來自我院2008年5月至2009年5月門診和住院患者,其中男性179例,女性121例,年齡8-72歲,平均年齡42.3歲。診斷均符合2005年修訂的《慢性乙型肝炎診治指南》的標準[1]。

1.2 試劑 HBsAg檢測試劑購自上?？迫A生物技術有限公司;HBV DNA試劑由中山大學達安基因診斷中心提供;HBV-S1Ag檢測試劑購自中科院上海阿爾法生物技術有限公司;HBV-S2Ag檢測試劑購自北京醫(yī)科大學肝病研究所;ALT檢測試劑購自美國Beckman公司。

1.3 儀器 采用的儀器有:芬蘭MK-3型酶標儀;Line-gene實時熒光定量PCR儀;美國Beckman CX9全自動生化分析儀。

1.4 實驗方法 ①乙肝病毒血清 HBsAg、HBVS1Ag、HBV-S2Ag采用ELISA 法測定;②HBV DNA采用熒光定量PCR技術;③ALT檢測采用速率法。

1.5 統(tǒng)計學方法 采用SPSS 13.0 for windows軟件進行分析,樣本率比較采用 χ2檢驗。以α=0.05為檢驗水準。

2 結果

2.1 乙肝患者Pre-S1Ag、Pre-S2Ag與HBV DNA的檢測結果(見表1)由檢測結果可見,300例乙肝患者Pre-S1Ag陽性組、Pre-S2Ag陽性組與Pre-S1Ag+Pre-S2Ag陽性組的例數與HBV DNA陽性組相比較沒有統(tǒng)計學差異(P均＞0.05)。

表1 乙肝患者血清Pre-S1Ag、Pre-S2Ag、HBeAg及HBV DNA的檢測結果

2.2 乙肝病毒 Pre-S1Ag、Pre-S2Ag陽性患者中HBV DNA陽性的比例分析(見表2)通過檢測結果可知,Pre-S1Ag+Pre-S2Ag陽性組中HBV DNA陽性的比例顯著高于Pre-S1Ag陽性組(P=0.008)和Pre-S2Ag陽性組(P=0.002)。

表2 Pre-S1Ag、Pre-S2Ag陽性的乙肝患者中HBV DNA的檢測結果

2.3 乙肝患者Pre-S1Ag、Pre-S2Ag陽性患者中ALT的檢測結果分析(見表3)通過檢測結果可知,Pre-S1Ag+Pre-S2Ag陽性組中ALT異常例數的比例顯著高于Pre-S1Ag陽性組(P=0.008)和Pre-S2Ag陽性組(P=0.017)。

表3 Pre-S1Ag、Pre-S2Ag陽性的乙肝患者中ALT的檢測結果

3 討論

長期以來,臨床一直是以HBeAg和HBV DNA的檢測作為診斷和治療的金標準[2]。但是約有30%的患者在HBeAg轉陰后,病毒仍在體內復制,其中部分可以發(fā)展為肝硬化或肝癌[3]。大量的研究認為HBeAg轉陰并不能表明HBV從體內清除或復制水平的降低,因為一旦HBV基因的前C區(qū)發(fā)生變異可導致HBeAg表達受限,而病毒本身復制并不受影響[4]。因此臨床上不能單靠HBeAg是否陽性來判斷病毒復制情況。而PCR方法測定HBV DNA易出現(xiàn)假陽性,且成本高,不易推廣。研究表明,乙肝病毒前S1抗原介導HBV病毒進入肝細胞,可作為HBV傳染性的指標[5],前S2抗原具有間接介導HBV對肝細胞吸附的作用,與病毒的活動性增殖有密切關系[6]。本文通過檢測乙肝患者血清Pre-S1Ag、Pre-S2Ag、HBV DNA及谷丙轉氨酶,來探討乙肝病毒Pre-S1Ag、Pre-S2Ag對于評價乙肝病毒的感染、復制及對肝功能影響的臨床意義。

我們的結果顯示,HBsAg陽性的乙肝患者中,其血清Pre-S1Ag、Pre-S2Ag的檢出率與HBV DNA的檢出率相比較沒有統(tǒng)計學差異,因此可以證明血清Pre-S1Ag、Pre-S2Ag是反映乙肝病毒復制的良好指標。在Pre-S1Ag、Pre-S2Ag雙陽性的患者中,其 HBV DNA的陽性率較高,且顯著高于單純的Pre-S1Ag陽性或Pre-S2Ag陽性患者。由此可見,聯(lián)合檢測Pre-S1Ag和Pre-S2Ag更有助于了解HBV病毒在體內的感染及復制的情況。對ALT的檢測中發(fā)現(xiàn),Pre-S1Ag、Pre-S2Ag雙陽性的患者中,其ALT的水平較高,且顯著高于單純的Pre-S1Ag陽性或Pre-S2Ag陽性患者,因此表明Pre-S1Ag、Pre-S2Ag雙陽性時患者肝功能損傷較單純Pre-S1Ag陽性或Pre-S2Ag陽性患者嚴重,聯(lián)合檢測Pre-S1Ag和Pre-S2Ag對于評價乙肝患者的肝功能損傷具有重要的臨床意義。通過本文的研究我們得出,聯(lián)合檢測Pre-S1Ag和Pre-S2Ag對HBV感染的早期診斷、了解HBV的復制以及檢測患者的肝功能具有重要的臨床意義,且檢測不需特殊儀器設備,操作簡單,故Pre-S1Ag、Pre-S2Ag是傳統(tǒng)乙肝病毒血清標志物有益的必要補充。

[1]中華醫(yī)學會肝病學分會和感染病學分會.慢性乙型肝炎防治指南[J].實用肝臟病雜志,2006,11(1):8.

[2]程 鋼,何蘊韻,周新宇.熒光定量聚合酶鏈反應檢測乙型肝炎病毒[J].中華醫(yī)學檢驗雜志,1999,22:135.

[3]Peng XM,Huang GM,Li JG,et al.High level of hepatitis B virus DNA afterHbeAg to anti-Hbeseroconversion is related to coexistence of mutations in its precore and basal core promoter[J].World J Gastroenterol,2005,11(20):3131.

[4]鐘 磊,袁樹人,孫錦榮.乙型肝炎病毒前S1蛋白及其抗體與HBV血清標志物的相關性[J].臨床檢驗雜志,1999,6(17):371.

[5]王家銀,關向宏.對乙型肝炎患者HBV Pre S1Ag、HBV DNA及生化指標的綜合分析[J].中國現(xiàn)代醫(yī)學雜志,2005,15:3340.

[6]李琪玲.前S2蛋白與乙型肝炎病毒復制的關系[J].現(xiàn)代中西醫(yī)結合雜志,2005,14:3035.