郭愛珍

（華中農(nóng)業(yè)大學農(nóng)業(yè)微生物學國家重點實驗室，華中農(nóng)業(yè)大學動物醫(yī)學院，湖北武漢 430070）

牛結(jié)核是主要由牛分枝桿菌引起的、慢性消耗性人獸共患傳染病。由于人類結(jié)核病的流行狀況十分嚴重，而人可通過呼吸道或飲用消毒不全的牛奶感染牛結(jié)核病，因此牛結(jié)核不允許免疫預防和治療，世界各國均采用檢疫和撲殺政策控制牛結(jié)核。OIE將其列為必須通報疫病，在我國屬二類動物傳染病，列為檢疫撲殺對象。

一、牛結(jié)核防控的意義

據(jù)估計，全球感染結(jié)核病的人數(shù)約占三分之一。2008年世界衛(wèi)生組織公布，全球有940萬新發(fā)病例，死亡182萬人，其中愛滋病陰性結(jié)核病人死亡130萬，陽性病人死亡52萬。中國是全球22個結(jié)核病高負擔國家之一，位居世界第二，僅次于印度。我國現(xiàn)有結(jié)核菌感染者4億人，結(jié)核病患者500萬人，每年因結(jié)核病死亡的人數(shù)達到15萬人（《全國結(jié)核病防治規(guī)劃（2001－2010年）》國辦發(fā)[2001]75號文件）。

牛分枝桿菌的宿主范圍廣泛，可感染人、50多種哺乳動物及25種禽類。結(jié)核牛是人結(jié)核病的傳染源之一。如發(fā)達國家在實施牛奶巴氏消毒前，人感染牛結(jié)核的比例達10%～30%，實施牛奶巴氏消毒與牛結(jié)核根除計劃后，人感染牛結(jié)核的比例降至1%以下。目前發(fā)展中國家約有10%～15%的人結(jié)核是由牛分枝桿菌引起，但無準確數(shù)字。此外，牛分枝桿菌對常用的人結(jié)核治療藥如利福平、丙嗪酰胺等具有天然抗性，給臨床治療帶來困難。因此，世界衛(wèi)生組織在其第七次專家委員會報告中指出：在那些流行牛結(jié)核病的國家，除非撲滅牛結(jié)核病，否則人類結(jié)核病的控制是不會成功的。

牛結(jié)核防控除了其公共衛(wèi)生意義外，對養(yǎng)牛業(yè)的影響也非常嚴重。牛感染牛分枝桿菌后，病初癥狀不明顯，精神和健康狀況隨病程發(fā)展而逐漸惡化。臨床癥狀與受害器官相對應，如肺結(jié)核時出現(xiàn)逐漸消瘦、咳嗽與呼吸困難；乳房結(jié)核時泌乳減少或停止，乳房中形成腫塊，且常波及乳房上淋巴結(jié)，嚴重者乳腺萎縮或腫大變硬但無熱無痛；腸結(jié)核時便秘和腹瀉交替出現(xiàn)，食欲、消化和營養(yǎng)物質(zhì)吸收紊亂；淋巴結(jié)核時淋巴結(jié)高度腫脹，硬而凹凸不平，其中有干酪樣壞死；生殖器官結(jié)核時性欲亢進，母畜屢配不孕，孕畜可以出現(xiàn)流產(chǎn)等。病牛尤其是開放性結(jié)核病牛，通過鼻汁、唾液、痰液、乳汁和生殖器官分泌物將結(jié)核菌排出體外，污染飼料、飲水、空氣和周圍環(huán)境，經(jīng)呼吸道和消化道感染牛、人及其他動物。

該病據(jù)不完全統(tǒng)計，世界范圍內(nèi)有5 000萬頭牛感染了結(jié)核,造成的直接經(jīng)濟損失每年達30多億美元。

二、牛結(jié)核病凈化標準

根除牛結(jié)核病是人們近一個世紀來的夢想，但對于牛結(jié)核這樣一個宿主譜廣泛、持續(xù)感染普遍、病程經(jīng)過緩慢、沒有疫苗、沒有先進快速診斷技術(shù)的疾病，實施根據(jù)計劃要比口蹄疫難得多。歐美國家實施牛結(jié)核根除計劃已有40余年，歐洲多個國家如丹麥、比利時、挪威、德國、荷蘭、瑞典、芬蘭、盧森堡、澳大利亞等已消滅了牛結(jié)核，日本、英國、法國、美國、加拿大等已控制了家畜牛結(jié)核，其中英國、美國、加拿大等國的牛結(jié)核主要在野生動物中流行。但至今尚無任何國家獲得OIE“無結(jié)核”認可（表1）。

表1 已控制牛結(jié)核的國家

OIE無結(jié)核國家或地區(qū)的認可標準是：

（1）牛結(jié)核感染應該是必須通報疾病，牛包括圈養(yǎng)或散養(yǎng)的牛、水牛和野牛；

（2）正在執(zhí)行一個公眾認知計劃，鼓勵報告所有牛結(jié)核可疑病例；

（3）連續(xù)3年定期檢查所有黃牛、水牛和野牛的牛結(jié)核感染，99.8%的牛群應為牛結(jié)核陰性，99.9%的牛應為陰性；

（4）應有一個監(jiān)測計劃，通過生前與死后檢查監(jiān)測牛結(jié)核；

（5）如果實施上述（3）（4）監(jiān)測計劃連續(xù)5年未檢測到牛結(jié)核感染，生前與死后檢查的牛結(jié)核監(jiān)測計劃還應該堅持；

（6）如果牛（黃牛，水牛，和野牛）引入無牛結(jié)核的國家時，必須出具官方獸醫(yī)開具的表明牛群來自于無牛結(jié)核國家或地區(qū)的證明，或出示符合相關(guān)法規(guī)的官方證明。

歐盟“官方無結(jié)核牛群（TBOF）”的認可標準是：

(1) 連續(xù)6年每年確定為結(jié)核感染牛群的比例不超過0.1%，或連續(xù)6年每年達到TBOF狀態(tài)的牛群至少為99.9% ，計算時間為每年的12月31日。

(2) 每頭牛的檢疫都必須符合歐盟法規(guī)。

(3) 所有屠宰牛都必須進行官方尸體檢查，其檢查結(jié)果將決定是否應停止或取消其TBOF資格。

三、國外牛結(jié)核防控與凈化經(jīng)驗

發(fā)達國家牛結(jié)核的主要防控經(jīng)驗可歸納如下：

1.制定并切實實施牛結(jié)核控制和撲滅計劃。上世紀初，歐美國家的牛結(jié)核感染率很高，10%以上的人結(jié)核病例被證實由牛分支桿菌引起，貿(mào)易加劇牛結(jié)核的傳播，引起了農(nóng)場主和政府的高度關(guān)注。為了保障公共健康，控制牛結(jié)核，促進貿(mào)易，政府決定執(zhí)行牛結(jié)核根除計劃，并以消滅牛結(jié)核為最終目標，農(nóng)場主積極響應。根除計劃的基本方法是檢疫和撲殺。

2.制定有效的法律法規(guī)確保根除和控制計劃的順利實施。通過立法統(tǒng)一根除計劃的實施程序與方法，明確無規(guī)定疫病的標準，在中央、地方財政與養(yǎng)殖者之間合理分配疫病控制成本，并強制執(zhí)行，這些是各國成功控制或消滅傳染病的重要經(jīng)驗。

歐盟第一個與牛結(jié)核根除計劃有關(guān)的法令Council Directive 64/432/EEC于1964年發(fā)布，對TBOF牛群進行了界定。在Council Directive 97/12/EC (17 March 1997,Anon., 1997)中， 對 TBOF牛群界定標準進行了修改。在Commission Regulation (EC) No. 1226/2002（8 July 2002，Anon., 2002b) 中，對附錄B牛結(jié)核診斷技術(shù)進行了修改。在法令Council Directive 77/391/EEC（17 May 1977，Anon., 1977）中，對牛結(jié)核等病根除措施的實施進行了財務預算；在Council Decision 90/424/ EEC（26 June 1990，Anon., 1990）中，進一步制定了根除計劃的財政補償規(guī)定。這些法規(guī)導致各成員國積極參加牛結(jié)核根除計劃，丹麥（1980）、荷蘭（1995）、德國和盧森堡（1997）、奧地利（1999）、法國（2001）、比利時（2003）、芬蘭和瑞典（1995）、捷克共和國（2004）等國相繼獲得歐盟的TBOF認可。

3.堅決實施與動態(tài)評估牛結(jié)核控制和根除計劃的實施效果。疾病控制和根除從時間上是一個循序漸進的過程，如包括疫病普查，免疫降低感染率，感染群清群，目標群監(jiān)測，無感染群，持續(xù)感染，保持無感染群，疫病撲滅等不同階段；從空間上是一個擴大的過程，先在局部地區(qū)達到具體疫病的控制或消滅的目標，最終在全國范圍內(nèi)達到無規(guī)定疫病狀態(tài)，這是歐盟、美國、澳大利亞的成功經(jīng)驗。歐盟作為一個多成員國家的聯(lián)合組織體會更深，其基本作法是：疫情得到控制或撲滅的省/州/成員國將獲得官方頒發(fā)的“無規(guī)定動物疫病證書”，嚴格推行區(qū)域化管理和市場限制制度以防止再度感染，即無疫病地區(qū)可自由進行相應動物和動物產(chǎn)品的交易，而未控制疫情地區(qū)的動物和動物產(chǎn)品禁止進入無疫病區(qū)。在計劃執(zhí)行早期，由于少數(shù)局部無疫病地區(qū)受到周圍疫病流行區(qū)的威脅，重新暴發(fā)疫病的風險極大，持續(xù)監(jiān)測和動物及其產(chǎn)品的市場移動限制對維持其無疫病狀態(tài)非常重要。

由于宿主范圍廣泛，感染與發(fā)病過程緩慢，無疫苗，無快速高通量檢測方法，及政府財力等多方面的原因，實施牛結(jié)核的根除計劃更是一個慢長的過程，政府、獸醫(yī)和民眾對根除計劃長期保持信心與熱情尤其重要。

美國是世界上第一個著手消滅牛結(jié)核的國家，從1917年開始執(zhí)行牛結(jié)核根除計劃，以50年間花費4.5億美元的代價在許多牛群根除了牛結(jié)核病。由于野生白尾鹿感染牛結(jié)核，美國尚未獲得無結(jié)核認可。

歐盟成員國的牛結(jié)核根除計劃實施了半個多世紀，雖然許多成員國相繼獲得歐盟的TBOF認可。英國1950年開始在全國正式實施牛結(jié)核根除計劃，但由獾等野生動物感染與傳播牛結(jié)核導致牛結(jié)核至今未根除，目前每年約花費7 400萬英鎊進行牛結(jié)核監(jiān)測。

澳大利亞1970年開始全面展開牛結(jié)核病根除計劃，依賴“檢測和撲殺”方法，結(jié)合屠宰場疾病監(jiān)測和來源跟蹤等重要措施，終于在1997年12月，歷時27年，終于根除了牛結(jié)核病。但計劃實施中途也曾多次質(zhì)疑牛結(jié)核根除的可能性，但最終選擇了堅持，并獲得成功。

4.重視新技術(shù)開發(fā)與應用。準確檢測牛結(jié)核是根除牛結(jié)核的前提，這首先需要一種實用、精確、快速、高通量的監(jiān)測方法。結(jié)核菌素皮內(nèi)變態(tài)反應試驗（TST）是目前世界動物衛(wèi)生組織（OIE）唯一推薦的牛結(jié)核病診斷方法，也是各個國家用于牛結(jié)核病檢疫的基本方法。但TST的特異性受其他非致病性分枝桿菌影響，操作復雜，結(jié)果判斷主觀性強，不適合于野生動物。各發(fā)達國家在結(jié)核病控制上均利用了IFN-γ體外釋放檢測等實驗室輔助檢測方法，這些方法基于結(jié)核桿菌的特定抗原提高靈敏度與特異性、可實現(xiàn)高通量檢測、不需回訪、快速簡便，歐、美、加拿大、澳大利亞、新西蘭等多個國家的應用均證實其效果良好。病理學診斷與細菌性診斷也可作輔助診斷，但只對撲殺后動物的確診有意義。

結(jié)核桿菌抗體快速診斷方法可用于動物結(jié)核病的初篩，由于感染者抗體水平與病程呈正相關(guān)，在政府無力全面淘汰所有結(jié)核感染者的情況下，及時淘汰抗體陽性牛具有重要意義。韓國、美國已經(jīng)上市了牛結(jié)核抗體檢測膠體金試紙條。我國也已研究出類似產(chǎn)品。

此外，地理信息系統(tǒng)（GIS)）或地球定位系統(tǒng)（GPS)被用于結(jié)核病流行病學監(jiān)控與可追溯。

四、我國牛結(jié)核流行現(xiàn)狀與防控

牛結(jié)核是我國法定的檢疫對象。按《牛結(jié)核病防治技術(shù)規(guī)范》規(guī)定，我國對牛結(jié)核的監(jiān)測比例為：種牛、奶牛100%，規(guī)模場肉牛10%，其它牛5%，疑似病牛100%。并及時撲殺結(jié)核陽性牛。但由于財政補償標準太低及地方與個人承擔比例過高等原因，各地不檢或盲報現(xiàn)象嚴重，因此，關(guān)于我國牛結(jié)核流行現(xiàn)狀的準確數(shù)據(jù)不詳。不同機構(gòu)進行的奶牛結(jié)核流行病學調(diào)查所獲得的數(shù)據(jù)有差異，可能與采樣方式和調(diào)查選點有關(guān)，且基本上調(diào)查結(jié)果都未公開。但可以肯定的是，我國牛結(jié)核尤其是奶牛結(jié)核呈上升與蔓延趨勢，在牛結(jié)核病防控與凈化方面存在如下瓶頸問題：

1.尚未制定有效的牛結(jié)核防控與凈化計劃。雖然我國一直將牛結(jié)核列為檢疫撲殺對象，但尚未制定牛結(jié)核的防控與凈化計劃，因此，我國牛結(jié)核防控與凈化尚缺少國家層面的整體謀劃、進程預計和具體目標。

2.流行病學家底不清。雖然不同機構(gòu)都對牛結(jié)核進行了一些流行病學抽樣調(diào)查，從不同層面獲得一些局部地區(qū)的牛結(jié)核流行病學資料，但處于疫情保密及錯誤庇護當?shù)仞B(yǎng)牛業(yè)的畸形發(fā)展、或地方政府經(jīng)濟拮據(jù)不愿承擔補償費用等多種原因，使得流行病學調(diào)查難以實施高覆蓋率采樣，流行病學結(jié)核結(jié)果難以透明化。因此，國家和地方政府實施檢疫撲殺政策的關(guān)鍵問題“殺多少？殺多久？”基本上心中無數(shù)。

“怎么殺？”問題是一個值得深入研究的科學問題。目前所用的牛結(jié)核菌素皮內(nèi)變態(tài)反應檢出的是感染陽性牛，眾所周知牛結(jié)核是一種以潛伏感染為主的慢性傳染病，只有約10%的感染者發(fā)展為臨床活動性結(jié)核病。我國牛結(jié)核感染率很高，感染陽性?；鶖?shù)大，撲殺的大部分?？赡苤皇菨摲腥九＃形串a(chǎn)生肉眼可見的病理變化，這也可能是老百姓逃避撲殺的原因之一。研究一種最為經(jīng)濟的無害化處理方式非常有益于降低成本和提高防控效果。有專家建議，可以考慮將陽性牛送至生物安全條件好、具有相應資質(zhì)隔離條件、政府授權(quán)或指定的屠宰加工場集中屠宰、實行無害化處理與綜合利用。在控制好牛結(jié)核傳播風險的前提下，該建議應該是條合理化建議。

3.牛群流動可追溯體系不健全。

根據(jù)疫病流行情況進行區(qū)域化管理、限制牛群流動、實行可追溯體系是發(fā)達國家控制牛結(jié)核及其它重大疫病的重要措施和成功經(jīng)驗。我國牛群流動監(jiān)管力度太少、區(qū)域之間無序流動現(xiàn)象普遍發(fā)生和基本無可追溯體系等是導致牛結(jié)核蔓延的重要原因。

4.缺乏有經(jīng)濟活力的政策法規(guī)。

雖然國家中多個相關(guān)文件中均對牛結(jié)核給予了深切關(guān)注，如國務院頒發(fā)了“國務院關(guān)于促進奶業(yè)持續(xù)健康發(fā)展的意見”（國發(fā)〔2007〕31號），強調(diào)“完善奶牛重大疫病防治和撲殺政策，將患結(jié)核病、布氏桿菌病而強制撲殺的奶牛，列入畜禽疫病撲殺補貼范圍?！?。但由于補貼標準已是數(shù)年前制定的，與當前牛價相比額度過小，地方政府與個人承擔比例過大等原因，導致相關(guān)政策缺乏經(jīng)濟活力，各方不能積極配合。

5.公眾認知水平有待提高。由于結(jié)核病是一種慢性傳染病，盡管感染基數(shù)大，但發(fā)病數(shù)相對較少，發(fā)病早期缺少特異性臨床癥狀，撲殺的結(jié)核感染陽性牛相當部分無明顯肉眼可見的病理變化，導致公眾對牛結(jié)核的防控意義認識不足，而任何疫病防控與凈化計劃如果得不到公眾的正確理解與熱情配合是難以順利實施的，因此公眾認知水平低很大程度上妨礙了牛結(jié)核防控與凈化。

6.牛結(jié)核防控相關(guān)技術(shù)研發(fā)進度慢。目前動物疫病種類多，計劃免疫、檢疫與監(jiān)測對象多，導致基層防疫人員工作負擔過重。加之牛結(jié)核檢疫勞動強度大、耗時長、經(jīng)濟條件差的地區(qū)陽性牛撲殺補償無法兌現(xiàn)等原因，牛結(jié)核少檢、不檢現(xiàn)象相當普遍。結(jié)核分枝桿菌本身的特點如生長慢、病程長、持續(xù)感染普遍、病例難以人工復制、細胞免疫與體液免疫分離、新型檢測技術(shù)缺乏高效的金標準評估方法等給研究快速準確的檢測方法帶來諸多挑戰(zhàn)，國家對診斷試劑審批手續(xù)多、周期長在一定程度上也影響了新型技術(shù)的市場轉(zhuǎn)化。

7.野生動物結(jié)核有待重視。由于家養(yǎng)牛的結(jié)核病防控進程緩慢，野生動物結(jié)核病控制尚未得到重視。目前我國對生活在野外的野生動物結(jié)核病的流行情況的了解處于空白，對圈養(yǎng)野生動物如梅花鹿等有一定的了解，但無控制措施。據(jù)估計，梅花鹿結(jié)核病的流行率較高，對人類健康存在較大的風險。

總之，由于無有效疫苗，各個國家牛結(jié)核根除計劃的基本策略是“檢測和撲殺”，檢測的基本手段是沿用了百余年的牛結(jié)核菌素皮內(nèi)變態(tài)反應。發(fā)達國家的經(jīng)驗表明，根除牛結(jié)核需要各級政府、各級官員、專家、獸醫(yī)防疫人員、養(yǎng)殖業(yè)主和消費者等多方面力量的配合，立法和經(jīng)濟賠償是保障。我國牛結(jié)核雖然一直受到黨和政府的重視，但牛結(jié)核的凈化計劃尚未起步。

參考方獻（略）