梅 嬌,劉興文

(重慶市北碚區(qū)中醫(yī)院,重慶北碚 400700)

首烏神應(yīng)丹為我院主任醫(yī)師傅燦鋆經(jīng)驗(yàn)方制成的中藥制劑,由何首烏、熟地、川芎、白芍等組成,具有養(yǎng)血補(bǔ)腎、祛風(fēng)生發(fā)功效,臨床用于血虛風(fēng)盛之脫發(fā)、頭皮發(fā)癢、頭屑多、病后及產(chǎn)后脫發(fā)、斑禿、全禿。為控制制劑的質(zhì)量,我們對(duì)其質(zhì)量進(jìn)行了鑒別,總結(jié)如下。

1 試驗(yàn)材料

器材:顯微鏡(OLYMPUS),UV-1型三用紫外分析儀(上海顧村光電儀器廠),硅膠 G板(預(yù)制板,青島海洋化工廠分廠)。

藥品與試劑:對(duì)照品、對(duì)照藥材(購(gòu)自北京藥品生物制品檢定所),試劑均為 AR(購(gòu)自重慶化玻公司),首烏神應(yīng)丹為本院制劑室提供。

2 顯微鑒別

取本品粉末少許,置顯微鏡下觀察。草酸鈣簇晶散在,直徑 10～80(160)μm。淀粉粒單粒類(lèi)圓形,直徑 4～5μm,臍點(diǎn)人字形、星形,大粒可見(jiàn)層紋,復(fù)粒由 2～9分粒組成。草酸鈣簇晶存在于薄壁細(xì)胞中,含晶細(xì)胞類(lèi)方形或長(zhǎng)方形,縱列成行,有的一個(gè)細(xì)胞內(nèi)含 2個(gè)或數(shù)個(gè)簇晶。草酸鈣針晶成束存在于黏液細(xì)胞中、或散在,長(zhǎng) 25～75(93)μm。韌皮薄壁細(xì)胞紡錘形,壁略厚,表面有極微細(xì)斜向交錯(cuò)紋理,有的可見(jiàn)菲薄的橫隔。

3 薄層鑒別

何首烏的鑒別:取本品 8g,研細(xì),加甲醇 20mL,冷浸過(guò)夜,濾過(guò),濾液蒸干,加 5%氫氧化鈉溶液 5mL使溶解,移入分液漏斗中,加鹽酸酸化,用乙酸乙酯 10mL振搖提取,分取乙酸乙酯層,濃縮至 2mL,作為供試品溶液。另取何首烏對(duì)照藥材2g,同法制成對(duì)照藥材溶液。按處方量,取除何首烏以外的其余藥材,按制劑工藝及供試品溶液的制備方法,制得缺何首烏的陰性對(duì)照溶液。照薄層色譜法(中國(guó)藥典 2005年版一部附錄 VIB)試驗(yàn),吸取上述 3種溶液各 5μL,分別點(diǎn)于同一用0.5%氫氧化鈉溶液制備的硅膠 G薄層板上,以甲苯 -乙酸乙酯 -甲酸(15∶2∶1)為展開(kāi)劑,展開(kāi),取出,晾干,置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中,在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上,顯相同的橙色熒光斑點(diǎn);置氨蒸氣中熏后,日光下檢視,斑點(diǎn)變?yōu)榧t色。陰性對(duì)照液色譜相應(yīng)的位置上不顯示斑點(diǎn)。

川芎及當(dāng)歸的鑒別:取本品 4g,研細(xì),加乙醚 15mL,超聲處理 15min,濾過(guò),濾液揮干,殘?jiān)右宜嵋阴?1mL使溶解,作為供試品溶液。另取川芎對(duì)照藥材和當(dāng)歸對(duì)照藥材各 0.5g,分別加乙醚 15mL,同法制成川芎對(duì)照藥材溶液和當(dāng)歸對(duì)照藥材溶液。按處方量,取除川芎、當(dāng)歸以外的其余藥材,按制劑工藝及供試品溶液的制備方法,制得缺川芎、當(dāng)歸的陰性對(duì)照溶液。照薄層色譜法(中國(guó)藥典 2005年版一部附錄 VIB)試驗(yàn),吸取上述四種溶液各 3μL,分別點(diǎn)于同一硅膠 G薄層板上,以正己烷 -乙酸乙酯(9∶1)為展開(kāi)劑,展開(kāi),取出,晾干,置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中,在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上,顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。陰性對(duì)照液色譜相應(yīng)的位置上不顯示斑點(diǎn)。

白芍的鑒別:取本品 20g,研細(xì),加硅藻土 8g,研勻,加乙醇40mL,超聲處理 20min,濾過(guò),濾液蒸干,殘?jiān)铀?20mL使溶解,用乙醚提取至乙醚層無(wú)色,棄去乙醚液,水層用水飽和的正丁醇提取 3次,每次 20mL,合并正丁醇提取液,用水洗滌 3次,每次 15mL,棄去水液,正丁醇液蒸干,殘?jiān)右掖?1mL使溶解,加少許中性氧化鋁,水浴上拌勻干燥,裝入預(yù)先裝填好的中性氧化鋁小柱(200～300目,1g,內(nèi)徑 10～15mm)頂部,以甲醇 40mL洗脫,收集洗脫液,蒸干。殘?jiān)右掖?1mL溶解,作為供試品溶液。另取芍藥苷對(duì)照品,加乙醇制成每 1mL含1.5mg的溶液,作為對(duì)照品溶液。按處方量,取除白芍以外的其余藥材,按制劑工藝及供試品溶液的制備方法,制得缺白芍的陰性對(duì)照溶液。照薄層色譜法(中國(guó)藥典 2005年版一部附錄 VIB)試驗(yàn),吸取上述供試品溶液和陰性對(duì)照溶液各4μL、對(duì)照品溶液 3μL,分別點(diǎn)于同一硅膠 G薄層板上,以三氯甲烷 -乙酸乙酯 -甲醇 -甲酸(40∶5∶10∶0.2)為展開(kāi)劑 ,展開(kāi),取出,晾干。噴以 5%香草醛硫酸溶液,在 110℃加熱至斑點(diǎn)清晰。供試品色譜中,在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上,顯相同顏色的斑點(diǎn)。陰性對(duì)照液色譜相應(yīng)的位置上不顯示斑點(diǎn)。

天麻的鑒別:取本品 8g,研細(xì),加 75%乙醇 20mL,超聲處理 30min,濾過(guò),濾液蒸干,殘?jiān)蛹状?2m L使溶解,作為供試品溶液。另取天麻素對(duì)照品,加甲醇制成每 1mL含 1mg的溶液,作為對(duì)照品溶液。按處方量,取除天麻以外的其余藥材,按制劑工藝及供試品溶液的制備方法,制得缺天麻的陰性對(duì)照溶液。照薄層色譜法試驗(yàn)[1],吸取上述 3種溶液各 3～5μL,分別點(diǎn)于同一硅膠 G薄層板上,以三氯甲烷 -甲醇(7∶3)為展開(kāi)劑,展開(kāi),取出,晾干。噴以 10%磷鉬酸乙醇溶液,在 105℃加熱至斑點(diǎn)清晰。供試品色譜中,在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上,顯相同顏色的斑點(diǎn)。陰性對(duì)照液色譜相應(yīng)的位置上不顯示斑點(diǎn)。

熟地的鑒別:取本品 15g,研細(xì),加甲醇 100mL回流提取2h,回收甲醇后殘?jiān)铀?10mL溶解,用正丁醇提取 3次,每次10mL,合并正丁醇液,水浴揮干,殘?jiān)铀?5mL溶解,濾過(guò),濾液加至預(yù)先裝填好的活性炭柱(200～300目,10g,內(nèi)徑 10～15mm)的頂部,先以水 200mL洗脫,再以 5%乙醇 150mL洗脫,最后用 20%乙醇 80mL洗脫,收集 20%乙醇洗脫液,濃縮至 1mL,作為供試品溶液。另取熟地對(duì)照藥材 1g,同法制成對(duì)照藥材溶液。按處方量,取除熟地以外的其余藥材,按制劑工藝及供試品溶液的制備方法,制得缺熟地的陰性對(duì)照溶液。吸取上述 3種溶液各 20μl,分別點(diǎn)于同一硅膠 G薄層板上,以醋酸乙酯 -甲乙酮 -甲酸 -水(5∶3∶1∶1)為展開(kāi)劑,展開(kāi),取出,晾干。噴以 1%香草醛乙醇溶液及 3%過(guò)氯酸水溶液的等量混合溶液。供試品色譜中,在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上,顯相同顏色的斑點(diǎn)。陰性對(duì)照液色譜相應(yīng)的位置上不顯示斑點(diǎn)。

4 小 結(jié)

以上薄層色譜鑒別方法,選擇的色譜條件具有分離好、重復(fù)性好、陰性無(wú)干擾等特點(diǎn)?？勺鳛槭诪跎駪?yīng)丹中該藥材的質(zhì)量控制指標(biāo)。

關(guān)于川芎和當(dāng)歸的薄層鑒別,選擇用川芎藥材和當(dāng)歸藥材共同作對(duì)照,是因?yàn)榇ㄜ汉彤?dāng)歸的薄層色譜條件相同,在色譜圖上有部分相同的色譜斑點(diǎn),采用川芎和當(dāng)歸雙陰的陰性對(duì)照液,避免了它們?cè)谏V圖上的相互干擾。

[1]國(guó)家藥典委員會(huì).中國(guó)藥典[M].第一部.北京:化學(xué)工業(yè)出版社,2005.422,384.