胡群英 崔艷雙

妊娠期高血壓疾病是妊娠期特有的疾病，我國(guó)發(fā)病率9.4%，國(guó)外報(bào)道為7%～12%[1]，是孕產(chǎn)婦和圍生兒病率及死亡率的主要原因。近年來(lái)實(shí)驗(yàn)表明妊娠期高血壓疾病主要病理表現(xiàn)為滋養(yǎng)細(xì)胞侵入子宮內(nèi)膜過(guò)淺；同時(shí)子宮螺旋小動(dòng)脈重塑數(shù)量明顯減少，發(fā)生生理性重塑障礙[2]，導(dǎo)致胎盤(pán)組織缺血、缺氧。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)檢測(cè)正常產(chǎn)婦和重度子癇前期患者胎盤(pán)組織中VEGF蛋白的表達(dá)并記數(shù)微血管密度，以探討妊娠高血壓疾病患者胎盤(pán)組織血管病變的機(jī)制，為進(jìn)一步認(rèn)識(shí)妊娠期高血壓疾病的病因以及對(duì)其預(yù)防和診治開(kāi)辟新途徑。

1 材料與方法

1.1 研究對(duì)象 選取2007年1月～2008年1月在深圳市南山醫(yī)院剖宮產(chǎn)分娩者40例，其中重度子癇前期20例，平均年齡(27±3.28)歲，平均孕周(37±1.84)周，分類和診斷標(biāo)準(zhǔn)[1]參照全國(guó)統(tǒng)編教材《婦產(chǎn)科學(xué)》第7版，相應(yīng)妊娠周數(shù)的正常妊娠孕婦20例與其對(duì)照，平均年齡(26±2.06)歲，平均孕周(38±2.03)周，兩組孕婦的年齡、孕周、產(chǎn)次差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。兩組孕婦均排除其他妊娠合并癥及并發(fā)癥。兩組病例均經(jīng)剖宮產(chǎn)結(jié)束分娩，術(shù)前均未進(jìn)入產(chǎn)程。

1.2 方法

1.2.1 標(biāo)本采集 胎盤(pán)娩出后，立即切去全層胎盤(pán)組織大小約1.0cm3，無(wú)菌生理鹽水沖洗后置入中性甲醛中固定，石蠟包埋。

1.2.2 實(shí)驗(yàn)方法 采用SABC法測(cè)定胎盤(pán)組織中VEGF蛋白的表達(dá)，CD34多克隆抗體標(biāo)記微血管并計(jì)數(shù)MVD。

1.2.3 結(jié)果判定 判斷標(biāo)準(zhǔn)參照Birner[2]法，根據(jù)陽(yáng)性細(xì)胞顯色的比例及染色強(qiáng)度，做半定量判定。按陽(yáng)性細(xì)胞率評(píng)分:陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)占11%～50%為2分；陽(yáng)性率51%～80%為3分；＞80%為4分，按顯色程度評(píng)分:染色弱為1分；中等染色為2分；強(qiáng)染色為3分。然后將兩種評(píng)分結(jié)合起來(lái)分為4級(jí):無(wú)論染色強(qiáng)度如何，細(xì)胞陽(yáng)性率＜10%為陰性；評(píng)2～3分的為弱陽(yáng)性(+)；4～5分為中度陽(yáng)性(++)；6～7分為強(qiáng)陽(yáng)性(+++)。微血管密度定量方法:以CD34標(biāo)記血管內(nèi)皮細(xì)胞，參照Weidner[3]報(bào)道的方法:先在40倍光鏡下掃描整個(gè)切片，選擇5個(gè)血管密度最高的血管區(qū)，然后在400倍視野下計(jì)數(shù)5個(gè)不重復(fù)視野中被CD34染成棕黃色的血管數(shù)目，取其平均值作為微血管密度(MVD)。

2 結(jié)果

2.1 VEGF在兩組胎盤(pán)組織中的表達(dá)強(qiáng)度的比較 見(jiàn)表1。

2.2 兩組孕婦胎盤(pán)組織中MVD的比較 見(jiàn)表2。

2.3 重度子癇前期患者胎盤(pán)組織中VEGF、MVD的相互關(guān)系經(jīng)spearman’s檢驗(yàn)rs=0.896(P＜0.05)，VEGF與MVD呈正性相關(guān)。

表1 胎盤(pán)組織中VEGF的表達(dá)(例)

表2 胎盤(pán)組織中MVD值

3 討論

VEGF是作用于血管內(nèi)皮細(xì)胞的多功能細(xì)胞因子，具有促進(jìn)微靜脈、小靜脈通透性增加、血管內(nèi)皮細(xì)胞分裂、增殖、細(xì)胞質(zhì)鈣聚集以及誘導(dǎo)血管生成等作用。在血管生成過(guò)程中，往往有多種血管生成因子的協(xié)同作用，但只有VEGF是特異性地直接作用于血管內(nèi)皮細(xì)胞，是生理性血管生成的主要調(diào)節(jié)劑[4-5]。VEGF可在很多正常成人和動(dòng)物組織中表達(dá)，在成年機(jī)體生理狀態(tài)下，VEGF僅起維持原有血管密度及維持血管對(duì)運(yùn)輸營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)所需通透性的作用。在腫瘤、心肌缺血、視網(wǎng)膜病變、傷口愈合和風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎等病理情況下，VEGF表達(dá)異常增高。檢測(cè)VEGF表達(dá)水平有助于了解病情發(fā)展。

本實(shí)驗(yàn)采用免疫組化法檢測(cè)了重度子癇前期患者胎盤(pán)組織中VEGF蛋白的表達(dá)情況，結(jié)果顯示，VEGF在重度子癇前期患者胎盤(pán)組織中表達(dá)下降，這與Lyall等[6]研究結(jié)果是一致的，說(shuō)明VEGF表達(dá)減少可能引起滋養(yǎng)細(xì)胞對(duì)母體蛻膜侵入過(guò)淺，影響了子宮血管的重鑄，造成胎盤(pán)灌注不足，產(chǎn)生全身小血管痙攣等一系列病理生理變化。因此我們推測(cè)，胎盤(pán)組織VEGF合成和釋放減少，影響滋養(yǎng)細(xì)胞的分化、浸潤(rùn)及血管的形成，可能是子癇前期、子癇發(fā)病機(jī)制中的相關(guān)因素之一。本研究中所測(cè)定的子癇前期、子癇患者胎盤(pán)組織中VEGF有異常表達(dá)，并與MVD有相關(guān)性，充分說(shuō)明VEGF的促血管生成的作用，VEGF的減少影響胎盤(pán)血管的生成，造成胎盤(pán)血流減少，進(jìn)一步損傷血管內(nèi)皮細(xì)胞的功能，這可能是導(dǎo)致妊娠早期胎盤(pán)淺著床及胎盤(pán)血管重鑄障的重要環(huán)節(jié)之一，但VEGF在子癇前期、子癇發(fā)病過(guò)程中的血管病變機(jī)制仍有待于進(jìn)一步深入研究。

[1]樂(lè)杰.婦產(chǎn)科學(xué)[M].第7版.北京:人民衛(wèi)生出版社,2007:97-98.

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