拉里·戴雷一直覺(jué)得自己是個(gè)做大事的人，他一直夢(mèng)想著自己有一天能做個(gè)大冒險(xiǎn)家，成就一番事業(yè)，成為老婆和兒子心目中的大英雄。當(dāng)然，這一切只是夢(mèng)想，現(xiàn)在擺在眼前的是，他必須在圣誕節(jié)之前找到一份工作。他和妻子離婚了，如果他沒(méi)有工作，兒子將被判給妻子撫養(yǎng)。拉里不愿讓兒子失望，于是，在一番努力下終于找到了一份工作，也是唯一一份——紐約自然歷史博物館的守夜人。

夜深人靜，第一次當(dāng)守夜人的拉里手持特大號(hào)手電筒到自然歷史博物館上班。博物館的老守夜人告訴拉里說(shuō)他的任務(wù)就是“確保在晚上沒(méi)有任何東西能進(jìn)博物館，同樣也要確保沒(méi)有任何東西能走出博物館”。拉里覺(jué)得這個(gè)守夜人是老糊涂了，整個(gè)博物館除了他之外，還有什么活物能跑出去呢?從恐龍骨架到西部牛仔的拓荒史模型再到埃及金字塔，這些歷史悠久的東西擺放在整個(gè)巨大的博物館里，拉里覺(jué)得一個(gè)人晚上在這種地方，多少還是有點(diǎn)心里發(fā)毛。

然而，更讓他驚魂的在后頭。過(guò)了半夜，拉里突然聽(tīng)見(jiàn)博物館走廊有聲響，他回頭一看，一個(gè)碩大的恐龍骨架竟然活了過(guò)來(lái)，正咆哮著朝他蹦過(guò)來(lái)。躲過(guò)一劫的拉里發(fā)現(xiàn)除了恐龍之外，博物館其他的東西全都復(fù)活了：畫(huà)像中的猴子跑出來(lái)閑逛、三寸高的西部牛仔們綁架了拉里，把他放在模型鐵軌上讓火車(chē)軋、印第安勇士朝拉里投長(zhǎng)矛……驚魂不定的拉里來(lái)不及思考為什么這些東西會(huì)動(dòng)起來(lái)，他現(xiàn)在唯一要做的就是讓這些東西恢復(fù)原狀，否則他第二天肯定會(huì)被炒魷魚(yú)。在他絞盡腦汁想辦法的時(shí)候，偉大的救星——美國(guó)歷史上最聰明的總統(tǒng)泰迪·羅斯?！惲性诓┪镳^的總統(tǒng)騎馬雕像突然也復(fù)活了。在羅斯?？偨y(tǒng)的指引下，拉里開(kāi)始了自己夢(mèng)想已久但首次遇到的冒險(xiǎn)之旅，驚險(xiǎn)之余笑料百出。拉里能讓發(fā)狂的博物館居民安定下來(lái)嗎?他能保住這份來(lái)之不易的工作嗎?

當(dāng)然，拉里做到了，經(jīng)過(guò)幾個(gè)晚上的努力，拉里不僅使博物館里秩序井然，他還抓獲了企圖偷走博物館寶貝的三個(gè)壞蛋。拉里成了人們心中的大英雄，也成了兒子心中最偉大的爸爸。