殷海燕　王合群　周雍軍　石貴福

【摘要】 目的 本研究檢測(cè)5-TH在慢性HBV感染者血清的水平，分析其與ALT、HBV-DNA的相關(guān)性。方法 收集2008年2月至10月就診于本院的慢性HBV感染者及健康志愿者共62例，檢測(cè)其5-TH的含量。結(jié)果 慢性乙型肝炎組為5-TH的水平高于正常對(duì)照組，結(jié)果有顯著性差異（P<0.05）。HBV DNA、5-TH和ALT三者之間相關(guān)性分析：5-TH與HBV DNA呈負(fù)相關(guān)；5-TH與ALT之間成正相關(guān)。結(jié)論5-TH也許可以作為一個(gè)新指標(biāo)與ALT共同評(píng)價(jià)慢性HBV感染者。

【關(guān)鍵詞】 乙型肝炎;5羥色胺;免疫

本研究檢驗(yàn)健康人及慢性HBV感染者血清中5-TH的水平，觀察其與ALT、HBV-DNA等臨床常用指標(biāo)的相關(guān)性，以了解機(jī)體免疫功能，探索準(zhǔn)確全面地評(píng)價(jià)慢性HBV感染者免疫功能的方案及在抗病毒治療中的應(yīng)用前景。以期能對(duì)抗病毒治療前免疫功能的評(píng)價(jià)及抗病毒治療有所幫助。

1 資料與方法

1.1 研究對(duì)象 2008年2月~10月期間本院消化內(nèi)科就診的患者52例，男35例，女17例，年齡22~68歲，平均年齡（45.3±17.6）歲，均為慢性乙型肝炎患者。健康志愿者10例，男7例，女3例，年齡20~59歲，平均（36.1±14.5）歲，對(duì)位對(duì)照組。診斷和臨床分型符合2005年中華醫(yī)學(xué)會(huì)肝病學(xué)及感染病學(xué)分會(huì)聯(lián)合制定的《慢性乙型肝炎防治指南》。納入標(biāo)準(zhǔn)：年齡18~80，性別不限；乙肝五項(xiàng)中HBsAg為陽(yáng)性，其它項(xiàng)不限；HBV DNA為陽(yáng)性；半年內(nèi)未用過免疫調(diào)節(jié)劑。排除標(biāo)準(zhǔn)：合并除乙肝外其它各型肝炎病毒感染；存在肝炎病毒以外其它病毒、細(xì)菌、真菌感；有非感染性炎癥；患有自身免疫性疾病。

1.2 標(biāo)本采集與方法 5-HT樣本的制備：于清晨醒后平臥30 min，取血5 m，l置于含5%EDTA-Na20. 1 ml的聚丙烯塑料管中，混勻，500 r/min離心10 min，取血漿2 ml10 000 r/min離心30 min，去除上清液，剩下沉淀，加入1 ml稀釋液，混勻，取20μl測(cè)量血小板值，剩余液體10 000 r/min離心20 min，去除稀釋液，加入0. 8 ml重蒸水，混勻，立即放-40℃冰箱保存。

5-HT含量測(cè)定：將樣本于-40℃和4℃反復(fù)凍融2次，取200μl液體，加入10μl高氯酸，混勻， 10 000 r/min離心20 min，取上清液150μ，l加入內(nèi)標(biāo)1 ng/μlDHBA30μ，l取100μl進(jìn)樣。Water's雙泵，電化學(xué)檢測(cè)器檢測(cè)分析。其余血樣用于HBV DNA、ALT、乙肝五項(xiàng)等指標(biāo)的檢測(cè)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±sD)表示，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。各指標(biāo)間相關(guān)關(guān)系采用直線相關(guān)分析。所有數(shù)據(jù)均運(yùn)用SPSS(11.5)統(tǒng)計(jì)軟件處理。

2 結(jié)果

2.1 5羥色胺兩組情況 對(duì)照組為（161.45±31.3）ng/ml，慢性乙型肝炎組為（219.15±55.57）ng/ml，水平高于正常對(duì)照組，兩組比較均有顯著性差異（P<0.05）。

2.2 慢性乙型肝炎組HBV DNA、5羥色胺和ALT三者之間相關(guān)性分析 5-TH與HBV-DNA呈負(fù)相關(guān)（r=-0.769，P<0.05），5-TH與ALT之間成正相關(guān)（r=0.724，P<0.05），ALT與HBV-DNA呈負(fù)相關(guān)（r=-0.705，P<0.05）。

3 討論

HBV感染已經(jīng)成為一個(gè)全球性健康問題，對(duì)人類的健康和生命造成了嚴(yán)重危害。但并非所有被感染者的健康都會(huì)受到損害。受病毒和宿主免疫功能等因素影響，HBV感染后可出現(xiàn)不同的結(jié)局或臨床類型，宿主的免疫功能是決定HBV感染后病情發(fā)展和轉(zhuǎn)歸的重要因素。以5-TH為代表的細(xì)胞因子，可增強(qiáng)細(xì)胞免疫應(yīng)答^［1］。為了解慢性HBV感染者的免疫功能，張英劍等檢測(cè)了105例慢性乙型肝炎患者5-TH的水平，結(jié)果與正常對(duì)照組相比水平均顯著升高，本實(shí)驗(yàn)檢測(cè)了5-TH的水平結(jié)果顯示在慢性HBV感染者中5-TH水平較正常對(duì)照組高，該結(jié)果與與張英劍等的結(jié)論一致。當(dāng)沒有致病性的細(xì)菌、病毒等有害微生物侵犯人體時(shí)，機(jī)體的免疫系統(tǒng)處于相對(duì)靜息狀態(tài)。T細(xì)胞、B細(xì)胞和吞噬細(xì)胞等免疫細(xì)胞及其分泌的細(xì)胞因子的數(shù)量都處于一個(gè)較低的水平。當(dāng)有害微生物作用于人體免疫系統(tǒng)被激活后，上述免疫細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子也隨之增多。對(duì)于HBV等病毒感染來說，5-TH型細(xì)胞因子增多使機(jī)體的免疫功能增強(qiáng)，才有利于病毒的清除而使機(jī)體恢復(fù)健康^［2］。

5-TH是執(zhí)行非細(xì)胞溶解機(jī)制的主要細(xì)胞因子，同時(shí)具有免疫調(diào)節(jié)和直接抑制病毒復(fù)制的雙重作用：一方面，5-TH是Th1型細(xì)胞因子中的一員，有助于Th0向Th1分化，進(jìn)而促進(jìn)CTL的增殖、分化、成熟。因此可以促進(jìn)細(xì)胞介導(dǎo)的免疫應(yīng)答，有利于病毒的清除；另一方面，5-TH可以通過清除病毒的衣殼顆粒及其內(nèi)含有的復(fù)制性病毒基因組、使病毒RNA失穩(wěn)等途徑發(fā)揮直接抑制HBV復(fù)制的作用^［3］。為了探討5-TH在慢性乙型肝炎患者的水平及臨床意義，我們觀察了5-TH、HBV DNA和ALT之間的相關(guān)性。結(jié)果在慢性乙型肝炎組，5-TH和ALT都與HBV DNA呈負(fù)相關(guān)，5-TH與ALT之間呈正相關(guān)關(guān)系。根據(jù)以上結(jié)果推測(cè)在慢性乙型肝炎組，5-TH通過非細(xì)胞溶解機(jī)制抑制了HBV的復(fù)制，而溶細(xì)胞機(jī)制并未起明顯的作用^［4］。5-TH可能較ALT更適合于評(píng)價(jià)該組患者的免疫功能。慢性乙型肝炎組中兩種機(jī)制都發(fā)揮了作用，并且兩機(jī)制的抗病毒作用強(qiáng)度之間呈正相關(guān)關(guān)系。5-TH也許可以作為一個(gè)新指標(biāo)與ALT共同評(píng)價(jià)慢性乙型肝炎患者的免疫狀態(tài)。但是否有臨床價(jià)值還有待進(jìn)一步證實(shí)。

參考文獻(xiàn)

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［4］ Penna A,Del PG,Cavalli A,et al.Predominant T-helper 1 cytokine profile of hepatitis B virus nucleocapsid-specific T cells in acute self-limited hepatitis B.Hepatology,1997,25(4):1022-1027.