王正波 王偉麗 高 芳 孟建升

[摘要] 目的 建立溶栓膠囊的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。方法 采用HPLC法對溶栓膠囊中丹酚酸B的含量進行測定。結(jié)果 溶栓膠囊中丹酚酸B的含量在0.158-2.37μg的范圍內(nèi),有良好的線性關(guān)系,r=0.9999,平均回收率為99.91%,RSD為1.09%。結(jié)論 建立了溶栓膠囊的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn),該方法操作易行,穩(wěn)定可靠,用于溶栓膠囊中丹酚酸B的含量,可以用于該制劑的質(zhì)量控制。

[關(guān)鍵詞] 溶栓膠囊;丹酚酸B;HPLC

[中圖分類號] R927.2[文獻標(biāo)識碼] A[文章編號] 1004-8650(2009)12-170-02

溶栓膠囊是經(jīng)批準(zhǔn)生產(chǎn)的醫(yī)院中藥制劑,處方由葛根,當(dāng)歸,紅花,水蛭等七味藥組成,具有活血、破瘀、通經(jīng)散結(jié)、抗凝血,主治血瘀閉經(jīng),可降血壓降低血液黏稠度,防止血栓的形成和預(yù)防及治療中風(fēng)、冠心病等,經(jīng)過多年的臨床應(yīng)用證明其療效顯著。其主藥葛根的主要成分是丹酚酸B,因此,測定溶栓膠囊制劑中丹酚酸B含量對控制溶栓膠囊的質(zhì)量有著十分積極的意義。所以為了進一步提高標(biāo)準(zhǔn),保證制劑的穩(wěn)定可靠,我們采用高效液相法對制劑中的丹酚酸B進行了含量測定。

1儀器與試藥

Agilent1200高效液相色譜儀;色譜柱Agilent-C18(5μm,4.6mm×150mm),AEU-210電子天平,丹酚酸B對照品(批號:111562-200504,中國藥品生物制品檢定所),溶栓膠囊為商丘市中醫(yī)院提供(批號為090508,090509,090510),缺位陰性對照樣品由商丘市中醫(yī)院提供。甲醇為色譜純,水為純化水。

2方法與結(jié)果

2.1色譜條件[1]

Agilent-C18色譜柱(150mm×4.6mm,5μm),流動相:甲醇-乙腈-冰醋酸-水(30:10:1:59),檢測波長為286nm,柱溫:25℃,流速為1.0ml/min,進樣量10μl。

2.2對照品溶液的制備

精密稱取對照品丹酚酸B 15.80mg,置100ml的量瓶中,加75%甲醇溶解至刻度,搖勻,即得。

2.3供試品溶液的制備[1-2]

取供試品去除囊殼,傾出內(nèi)容物研細(xì),混勻,精密稱定1.0g,置具塞錐形瓶中,精密加入75%的甲醇50ml,稱定重量,加熱回流1小時,放冷,再稱定重量,用75%的甲醇補足減失重量,搖勻,濾過,取續(xù)濾液,用0.45μm 微孔濾膜濾過,即得。

2.4陰性對照品溶液的制備

除丹參外,其他各藥按供試品處方量投料按溶栓膠囊的制備工藝制成陰性對照品,然后按供試品的制備方法,制成陰性對照品溶液的制備。

2.5系統(tǒng)適應(yīng)性試驗

2.5.1 線性關(guān)系考察:分別吸取對照品溶液(0.158mg/ml)2.5、5、8、10、12、15μl各進樣兩次,記錄峰面積分值,以丹酚酸B峰面積積分值對進樣量進行回歸,得到回歸曲線Y=33.919X-18.628,r=0.9999。結(jié)果表明其線性關(guān)系良好,線性范圍為:0.158-2.37μg 。

2.5.2 精密度試驗:精密吸取上述對照品溶液10μL ,重復(fù)進樣6 次,按上述色譜條件測定峰面積。結(jié)果, RSD = 0.34% ,表明儀器精密度良好。

2.5.3 重復(fù)性試驗:精密稱取同一批(批號:090508) 樣品6 份,照“2.2”項下方法制備供試品溶液,按上述色譜條件進樣,測定。結(jié)果,平均含量為1.53mg/粒,RSD=0.27% ,表明本方法重復(fù)性良好。

2.5.4 穩(wěn)定性試驗:取供試品溶液(批號: 090508),分別于0、1、2、4、8、12h 各精密吸取10μl,按上述色譜條件測定峰面積積分值。結(jié)果,RSD=0.51%,表明供試品溶液在12h內(nèi)穩(wěn)定。

2.5.5 加樣回收率試驗:取已知含量的樣品6份各約0.5g,精密稱重,分別精密加入一定量的丹酚酸B對照品,照“2.3”項下方法制備供試品溶液,按上述色譜條件進樣10μl,測定,計算回收率。結(jié)果詳見表1。

3 樣品含量測定

按上述含量測定方法測定樣品中丹酚酸B含量。結(jié)果見表2。

4結(jié)論

在供試品制備的過程中,也曾考慮到其他樣品對葛根提取以及含量測定的影響[3],考察了用不同濃度的乙醇進行提取,結(jié)果發(fā)現(xiàn)以30%乙醇照中國藥典2005版一部葛根項下規(guī)定的提取,效果較好,峰面積較大,所以本試驗供試品的處理方法為中國藥典葛根項下的方法。

溶栓膠囊是醫(yī)院制劑,在長期的臨床實踐中證明,就有良好的療效,但是長期以來,以薄層鑒別作為該藥的標(biāo)準(zhǔn),沒有具體的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn),葛根是溶栓膠囊的主藥之一,本實驗通過用HPLC法對溶栓膠囊中丹酚酸B的含量進行測定。通過以上實驗,建立了溶栓膠囊制劑的質(zhì)量控制方法,該方法穩(wěn)定可靠,操作簡便,專屬性較強,可以作為溶栓膠囊制劑的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)的參考。

參考文獻:

[1] 國家藥典委員會編.中華人民共和國藥典(一部)[S].北京:化學(xué)工業(yè)出版社,2005:52.

[2] 楊翠微,張俊偉.HPLC測定參蘇丸中丹酚酸B的含量[J].湖南中醫(yī)藥導(dǎo)報,2000,6(16):36.

[3] 邵陸,李振志.HPLC法測定愈風(fēng)寧心膠囊中丹酚酸B的含量[J].齊魯藥事,2001,(4):23.

(收稿日期2009-08-23)