蔣桂芝　劉昌芬

摘要西雙版納引種的辣木主要病害具體表現(xiàn)癥狀為：嫩梢萎蔫、枝條潰瘍、枝條回枯、果莢褐腐，經(jīng)病原菌分離、接種和切片鏡檢，確認(rèn)是2種病原真菌引起。病原菌經(jīng)過(guò)培養(yǎng)，顯微鏡觀察，鑒定為半裸鐮刀菌(Fusarium semitectumBerk.& Rav.)和黑星菌(Fusicladium sp.)。

關(guān)鍵詞辣木；病害；半裸鐮刀菌；黑星菌屬

中圖分類號(hào)S 435.6

辣木(Moringa oleifera Lam.)是一種熱帶經(jīng)濟(jì)植物，原產(chǎn)于熱帶、南亞熱帶的干旱或半干旱地區(qū)。目前在我國(guó)云南、福建、海南等省的一些地區(qū)已出現(xiàn)規(guī)?；N植。云南省熱帶作物科學(xué)研究所于2002年引種在西雙版納開(kāi)始種植，種植面積6.7 hm²，年均生長(zhǎng)量達(dá)260 cm以上，種植6個(gè)月后開(kāi)花結(jié)莢，不定芽萌生能力強(qiáng)，嫩梢采摘期可長(zhǎng)達(dá)10個(gè)月左右，表現(xiàn)出良好的經(jīng)濟(jì)性狀。但在栽培試驗(yàn)過(guò)程中，病害發(fā)生較嚴(yán)重，造成植株長(zhǎng)勢(shì)衰弱、產(chǎn)量降低、種子失收，成為限制辣木發(fā)展的主要因素之一。

目前國(guó)內(nèi)關(guān)于辣木病害的研究詳細(xì)報(bào)道較少見(jiàn)。據(jù)國(guó)外資料報(bào)道，在目前栽培的辣木品種中已發(fā)現(xiàn)的病害有：果腐病(病原菌為Fusarium semitectum Berk. & Rav.)、枝條潰瘍(病原菌為F.pallidorseum)、幼苗萎蔫病(病原菌為F.oxysporum)等?，F(xiàn)將西雙版納辣木栽培過(guò)程中出現(xiàn)的主要病害進(jìn)行報(bào)道，為辣木種植者提供病害防治的依據(jù)。

1材料與方法

1．1病害觀察及標(biāo)本采集

觀察記錄田間各種病害發(fā)生的時(shí)間、危害癥狀特征，采集具有典型癥狀的病枝、病果和嫩梢作為病原菌分離及鏡檢的標(biāo)本。

1．2病原菌的分離、致病性測(cè)定

病原菌分離：將田間采回的樣本，用自來(lái)水沖洗晾干表面水分后，再用75％的乙醇表面消毒后進(jìn)行病原菌分離。用滅菌刀切取病健交界處(2～3)mm×(2～3)mm大小的組織置于PDA平板上在25～30℃室溫下培養(yǎng)5 d，隨后挑取有代表性的菌落進(jìn)行單孢分離純化培養(yǎng)，培養(yǎng)好后觀察病菌的形態(tài)特征，并用于致病性測(cè)定。

致病性測(cè)定：從植株上采下新鮮枝條及果莢等洗凈晾干作為接種材料，用75％的乙醇表面消毒備用。在準(zhǔn)備好的材料上用針刺法進(jìn)行接種，隨后將接種好的材料在25～30℃室溫下保濕培養(yǎng)5～7 d，觀察感病情況。然后將接種感病的材料進(jìn)行病原菌分離，在25～30℃室溫下培養(yǎng)5 d，觀察菌落形態(tài)特征，若與病斑分離到的菌落形態(tài)特征相一致確定為該病害的致病菌。

1．3培養(yǎng)形態(tài)特征及鑒定

將分離得到的致病菌在PDA培養(yǎng)基上培養(yǎng)5～7 d，進(jìn)行形態(tài)觀察、顯微觀測(cè)和照相記錄，依據(jù)病原菌的形態(tài)特征、產(chǎn)孢方式進(jìn)行鑒定。

1．4顯微鏡檢查

對(duì)莖干、嫩梢病斑標(biāo)本及田間接種感病后的材料進(jìn)行顯微鏡檢查，觀察菌絲體和其他營(yíng)養(yǎng)體的形態(tài)和結(jié)構(gòu)、孢子的形態(tài)和著生方式等。

2結(jié)果與分析

引起辣木主要病害的病原菌為：半裸鐮刀菌(Fusarium semitectum Berk.& Rav.)和黑星菌(Fusicladium sp.)兩種。

2．1半裸鐮刀菌

2．1．1危害癥狀及標(biāo)本鏡檢

半裸鐮刀菌危害辣木主要發(fā)生在高溫高濕的雨季，引起辣木嫩梢萎蔫、枝條回枯、果莢褐腐等。

(1)嫩梢萎蔫嫩梢感病后萎蔫(圖1a)，變成淺褐色或褐色，逐漸干枯死亡，病葉和芽脫落或不脫落，濕度大時(shí)在病梢上可以看到橙黃色孢子堆和白色菌絲體。

(2)枝條回枯在采梢枝條上，采梢后枝條形成傷口，病菌侵入，引起枝條回枯。感病初期呈水漬狀，隨后逐漸向下擴(kuò)展，使枝條逐漸萎蔫、干縮，芽不能正常抽生，濕度大時(shí)在干枯的枝條上也出現(xiàn)橙色的孢子堆和白色菌絲體。

(3)果莢褐腐感病部位縮小、果皮變薄，變成黃褐色或淺褐色、腐爛，病斑表面出現(xiàn)黑色厚垣孢子堆或橙黃色孢子堆和白色菌絲體。嫩果莢受害后變褐縮小、干枯，接近成熟期的果莢受害后受害部位果皮變薄、變色，并向周圍蔓延，最后導(dǎo)致整條果莢、種子腐爛(圖1b)。

標(biāo)本鏡檢枝條、果莢上感病部位呈現(xiàn)不規(guī)則黃斑，后期中間裂開(kāi)，水漬狀。病斑上有黑色點(diǎn)狀物為鐮刀菌厚垣孢子(圖2a)、尖孢枝孢菌(Cladosporium oxysporum Berk.&Curt.)；果莢感病后種子為水漬狀淺褐色干枯，制片鏡檢黃斑上仍為半裸鐮刀菌，枯死部位出現(xiàn)的黑色點(diǎn)狀物有：半裸鐮刀菌、黑星菌的厚垣孢子(圖3a)和混生的芭蕉擔(dān)擔(dān)孢菌(Haplobasidion musae M.B.Ellis)。

2．1．2致病性測(cè)定及病原菌鑒定

致病性測(cè)定嫩梢萎蔫、枝條回枯、果莢褐腐的病原均為同一種。將分離得到的菌株分別在嫩梢、枝條、果莢上進(jìn)行活體接種，接種感病率達(dá)100％。經(jīng)鏡檢，在芽點(diǎn)、節(jié)上和皮孔、果莢接種感病部位出現(xiàn)白色點(diǎn)狀物，均為半裸鐮刀菌的菌絲和小分生孢子；死亡的白色菌絲部位，是該菌的大分生孢子，未見(jiàn)到其他菌體。這種孢子的出現(xiàn)方式與分離培養(yǎng)過(guò)程中先產(chǎn)大分生孢子，后期再出現(xiàn)小分生孢子的表現(xiàn)方式相反。

所有接種感病部位均未出現(xiàn)尖孢枝孢菌、芭蕉擔(dān)擔(dān)孢菌等原標(biāo)本材料上出現(xiàn)的菌體，說(shuō)明它們不是引起發(fā)病的病原菌。

病原菌鑒定病原菌在PDA培養(yǎng)基上的形態(tài)特征為：菌落絨毛狀，表面菌絲直立卷曲，白色?；孔攸S褐色，底部淡棕褐色。菌絲無(wú)色，分支，具隔，寬2.5～3.5μm。分生孢子梗由菌絲上長(zhǎng)出，圓柱形，產(chǎn)孢細(xì)胞在頂端1～3個(gè)發(fā)育，瓶形，無(wú)色光滑，具齒狀孢痕(圖2b)，(10.0～19.0)μm×(3.0～3.5)μm，分生孢子梗常是多芽的齒狀。分生孢子頂生或頂側(cè)生，未成熟時(shí)兩端無(wú)油滴，成熟后3～5個(gè)橫隔，一般多為3個(gè)隔，淺橄欖色，微彎曲，(15.5～38.5)μm×(3.5～4.0)/am(圖2c)。老熟后，出現(xiàn)大小為(4.0～15.5)μm×(2.5～3.5)μm，0～2隔，圓柱形至倒卵形的小型分生孢子。厚垣孢子間生(圖2d)。菌絲的生長(zhǎng)溫度范圍18～30℃，最適溫度24℃。據(jù)其形態(tài)特征和產(chǎn)孢方式，鑒定本菌為半裸鐮刀菌(Fusarium semitectum Berk.& Rav.)。

2．2黑星菌(Fusicladium sp.)

2．2．1危害癥狀及標(biāo)本鏡檢

黑星菌危害辣木主要出現(xiàn)在高溫高濕的雨季6～10月，常發(fā)生在嫩枝和半木栓化的枝條上，造成枝條潰瘍。初期病斑水漬狀，后期病斑凹陷至木栓層，并形成裂紋，病斑上有黑色點(diǎn)狀厚垣孢子堆，病斑可隨梢條的生長(zhǎng)而逐漸消失。

標(biāo)本鏡檢：病斑下陷至木栓層，中間裂開(kāi)，病斑

上黑色點(diǎn)狀物為黑星菌暗褐色厚垣孢子。

2．2．2致病性測(cè)定及病原菌鑒定

致病性測(cè)定：將從病斑上分離得到的菌株在枝條進(jìn)行活體接種，接種全部感病。經(jīng)鏡檢，接種枝條感病褐色腐爛部位上，查到的是大量的黑星菌暗褐色厚垣孢子(圖1c黑色部分)，未見(jiàn)其他菌體。

病原菌鑒定：經(jīng)病原分離得到的病原菌在PDA培養(yǎng)基上的形態(tài)特征為：菌落邊緣白色，絨毛狀，逐漸變?yōu)榉奂t色粉狀，是初期的無(wú)色菌絲和分生孢子，菌絲2.5～5.5μm寬；中間黑色，同心輪紋狀，為后期老熟后形成的暗褐色厚垣孢子(圖3b)。厚垣孢子球形到扁球形(圖3a)，壁厚，光滑，鏈狀，孢痕顯著，(7.5～13.0)μm×(7.5～14.0)μm寬；菌落表面細(xì)絨毛狀，表層似膜狀，布滿分生孢子；黑色與邊緣粉紅色之間是灰褐色帶，為成熟菌絲和分生孢子堆。成熟菌絲褐色，6.5～13.0μm寬，多隔，稍彎曲，多分支，多圓形孢痕。孢子在無(wú)色細(xì)長(zhǎng)的菌絲頂端頂生或頂側(cè)生，合軸式延伸產(chǎn)孢(圖3c)。分生孢子紡錘形到棒狀，多數(shù)彎曲，少數(shù)直，頂端喙?fàn)?，基部平截，橄欖色?～1隔，多數(shù)無(wú)隔，多油滴，(12.5～30.0μm×(2.5～5.5)μm(圖3d)。本菌的生長(zhǎng)溫度范圍5～35℃，菌絲生長(zhǎng)最適溫度20～30℃，厚垣孢子產(chǎn)生適宜溫度25℃以上。由于未查到其有性階段，據(jù)其形態(tài)特征和產(chǎn)孢方式，鑒定該菌為絲孢綱黑星菌屬(Fusicladium sp.)的一種。

2．3小結(jié)

引起辣木莖干、嫩梢、果莢等自然發(fā)病的病原菌，經(jīng)分離、活體回接后，出現(xiàn)典型的感病癥狀和標(biāo)本制片鏡檢得到相同的真菌，證明是辣木的病原真菌，即主要病原真菌為半裸鐮刀菌(Fusari-um semitectum Berk.& Rav.)和黑星菌屬真菌(Fusicladium sp.)，這兩種病原菌的菌落形態(tài)、孢子形態(tài)及其引起的病害癥狀差異顯著。黑星菌屬真菌引起的癥狀無(wú)論在枝條、嫩枝、葉片和果莢上以水漬狀表皮腐爛為主，未見(jiàn)國(guó)內(nèi)外報(bào)道。半裸鐮刀菌引起果莢褐色腐爛，國(guó)外報(bào)道稱果腐病，在西雙版納其還侵染枝條和嫩梢，引起嫩梢萎蔫、枝條回枯等。

3討論

據(jù)國(guó)外資料報(bào)道，半裸鐮刀菌寄主范圍廣，是熱帶亞熱帶地區(qū)的廣布種，黑星菌屬真菌也是多種植物重要病原菌。西雙版納雨季氣溫一般為19～35℃，日均濕度在50％～85％之間，均在半裸鐮刀菌、黑星菌最適生長(zhǎng)范圍內(nèi)，可以單獨(dú)或共同侵染辣木，因此容易在雨季造成病害流行。這兩種病菌對(duì)辣木的危害規(guī)律和防治方法尚在進(jìn)一步研究。