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組培茅蒼術(shù)揮發(fā)油的氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用分析

2007-12-29 00:00:00巢建國劉海萍
云南中醫(yī)中藥雜志 2007年2期


  摘 要:目的:分析組織培養(yǎng)再生植株栽培后所得茅蒼術(shù)的根莖中所含揮發(fā)油的化學(xué)成分,對組織培養(yǎng)技術(shù)生產(chǎn)的茅蒼術(shù)藥材進(jìn)行品質(zhì)評價(jià)。方法:采用水蒸氣蒸餾提取法提取藥材揮發(fā)油,利用GC-MS聯(lián)用技術(shù)進(jìn)行分析。結(jié)果:從組織培養(yǎng)再生植株栽培茅蒼術(shù)的根莖中鑒定出22個(gè)化合物。結(jié)論:組織培養(yǎng)技術(shù)所生產(chǎn)的茅蒼術(shù)主要含有β-桉葉醇、蒼術(shù)醇、蒼術(shù)素等成分,與野生茅蒼術(shù)所含成分沒有顯著差異。
  關(guān)鍵詞:茅蒼術(shù);氣質(zhì)聯(lián)用;組織培養(yǎng);揮發(fā)油
  中圖分類號:R284 文獻(xiàn)標(biāo)識碼:A
  文章編號:1007—2349(2007)02—0039-02
  茅蒼術(shù)Atractylodes lancea(Thunb.)DC.為菊科多年生草本植物,根莖作蒼術(shù)人藥,臨床應(yīng)用廣泛。采用組織培養(yǎng)技術(shù)進(jìn)行其快速繁殖,可獲得大量再生植株,栽培后得到茅蒼術(shù)組培藥材,利用GC—MS聯(lián)用技術(shù)進(jìn)行分析,從而對組織培養(yǎng)技術(shù)能否應(yīng)用于茅蒼術(shù)藥材生產(chǎn)進(jìn)行初步評價(jià)。
  
  1儀器和樣品
  
  1.1儀器與試劑
  1.1.1儀器 HP5973-GC6890氣相色譜一質(zhì)譜聯(lián)用儀;
  1.1.2試劑 乙醚(分析純)。
  1.2樣品 茅蒼術(shù)組培藥材:2004年4月于南京中醫(yī)藥大學(xué)藥用植物組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室培育出茅蒼術(shù)試管苗,煉苗2~3天后移栽至江蘇省宜興市,10月采收。
  
  2實(shí)驗(yàn)方法
  
  2.1揮發(fā)油的提取 將藥材洗凈,除去須根,放陰涼處干燥,粉碎,過80目篩。取樣品10g,置于500 ml圓底燒瓶中,加入200 ml蒸餾水,浸泡30min,用揮發(fā)油提取器按水蒸氣提取法提取至油量不再增加。所得揮發(fā)油為褐色,有濃烈香氣,用乙醚定容至2 ml,備用。
  2.2 GC-MS分析條件 色譜柱:HP 5MS(30m×0.32mm,0.25μm)彈性石英毛細(xì)管柱;程序升溫:初始溫度60℃,保持5min,以5℃/min的速率升溫至230℃,保持20min;分流進(jìn)樣,分流比為20:1,流速為1μl/ml;進(jìn)樣口溫度250℃;倍增器電壓:1600V;溶劑延遲:4min。
  
  3結(jié)果
  
  按上述的GC—MS條件對揮發(fā)油進(jìn)行分析,得到總離子流圖,見圖1。
  對總離子流圖中的各峰經(jīng)質(zhì)譜掃描后得到質(zhì)譜圖,經(jīng)過質(zhì)譜計(jì)算機(jī)數(shù)據(jù)系統(tǒng)檢索,人工譜圖解析,按各色譜峰的質(zhì)譜裂片圖與文獻(xiàn)核對,查對有關(guān)質(zhì)譜資料,對基峰、質(zhì)核比和相對豐度進(jìn)行直觀比較,同時(shí)對一些主要組分采用標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)對照,分別對各色譜峰加以確認(rèn),綜合各項(xiàng)分析鑒定,確定出組培茅蒼術(shù)揮發(fā)油中的化學(xué)成分。
  從組培茅蒼術(shù)中分離出71個(gè)色譜峰,鑒定出22個(gè)成分,采用氣相色譜數(shù)據(jù)處理系統(tǒng),以面積歸一化法獲得揮發(fā)油各組分相對百分含量,主要成分見表1。
  
  
  4討論
  
  在鑒定出的組分中,組培茅蒼術(shù)主要含有β-桉葉醇(14.304%)、蒼術(shù)素(5.167%)、蒼術(shù)醇(3.216%)[1~3]、4,11~桉葉二烯(1.603%)、7-苯基-2-庚烯-4,6-二炔-1-醇(22.676%)等成分。其中前三者已有多數(shù)文獻(xiàn)報(bào)道,但在相對含量上有較大差異。其他如棕櫚酸[4](0.616%)、γ一欖香烯[5](0.412%)、亞油酸[4](0.286%)、石竹烯[5~6](0.282%)、愈創(chuàng)醇[2,4,](0.266%)、葎草烯[1,2,5,](0.216%)、石竹烯氧化物[6](0.186%)、欖香醇[1~3,5~6](0.012%)、α-蒎烯[1~3,6](0.012%)、α一水芹烯[1~3,5~6](0.012%)等成分也有報(bào)道。萜醇類組分和倍半萜烯類組分在揮發(fā)油中相對含量較高,另含有少量苯、苯酚類化合物。
  組培茅蒼術(shù)的主要化學(xué)組分與野生茅蒼術(shù)所含的主要成分相似,但在含量上有一定的差異,因此組培茅蒼術(shù)是否能夠真正代替野生或栽培茅蒼術(shù)用于臨床還需要進(jìn)一步的試驗(yàn)進(jìn)行驗(yàn)證。
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