李 蓉 煙 彬 邢惠梅 茹 鮮 曉 剛 艾合買提
20世紀50年代以前,品種純度鑒定技術(shù)發(fā)展到了田間小區(qū)鑒定和田間檢驗方法。50年代后,國際種子檢驗協(xié)會開始提出種子檢驗室鑒定品種的可能性和價值。70和80年代發(fā)展了電泳技術(shù)、幼苗鑒定技術(shù)和快速鑒定技術(shù)。90年代開始注意計算機模擬分析系統(tǒng)和分子技術(shù)的應(yīng)用。
1形態(tài)鑒定技術(shù)
1.1種子形態(tài)鑒定通過種子形狀、大小、色澤、質(zhì)地、表面的光與毛以及種子外表各部位的特征加以鑒別,以區(qū)分本品種與異品種。如,小麥可根據(jù)種子籽粒形狀和顏色、粒質(zhì)胚部性狀、頂端茸毛的有無及分布,籽粒皺痕等來鑒別;玉米種子根據(jù)粒形、粒色、粒質(zhì)、正面的長寬比及胚的凹陷程度來鑒別;棉花種子根據(jù)纖維長度、整齊度、棉籽形狀、大小、顏色、短絨有無及多少等來鑒別。隨著現(xiàn)代育種科學的發(fā)展,不同品種間種子外觀形態(tài)的差異越來越小,靠區(qū)別種子形態(tài)上的差異來鑒定種子純度也變得越來越困難。
1.2幼苗形態(tài)鑒定根據(jù)不同品種幼苗的獨特性狀進行檢驗,如幼苗芽鞘顏色、幼苗生長錐、子葉的形狀、顏色、大小等。
鑒定途徑有兩種,一種是提供給植株以加速發(fā)育的條件(類似于田間小區(qū)鑒定,只是所需時間較短),當幼苗達到適宜評價的發(fā)育階段時,對全部或部分幼苗進行鑒定;另一種途徑是讓植株生長在特殊的逆境條件下,測定不同品種對逆境的不同反應(yīng)來鑒別不同品種。該法簡便、省時,比種子形態(tài)法的使用范圍明顯擴大,但能用于鑒別的性狀仍不夠多,且受環(huán)境影響較大,因此無法鑒別性狀差異不明顯的品種。
1.3植株形態(tài)鑒定(田間小區(qū)種植鑒定)該法是將一定量的作物種子在田間種植一個小區(qū),單粒播種,不間苗、不定苗。設(shè)有標準樣品作對照,在檀株的不同發(fā)育時期與標準樣品進行比較對照。主要根據(jù)株形、株高片數(shù)、葉色、葉片寬窄、花藥顏色等做出評判,從而對不同品種加以鑒別。田間小區(qū)種植鑒定方式多種多樣,可在當?shù)赝?、當?shù)禺惣净虍惖禺惣痉N植鑒定。該方法能夠觀察、比較的性狀較多。結(jié)果準確、可靠。是目前解決種子質(zhì)量糾紛中最具有法律效力的檢測方法。缺點是費工、費時、鑒定周期長、費用高,而且此法受環(huán)境和人為影響較大,鑒定者的觀察經(jīng)驗也制約著鑒定的準確性。
2快速鑒定技術(shù)
2.1苯酚染色法適用于小麥、大麥、燕麥、水稻等。將種子用苯酚染色,根據(jù)染色程度的差異來區(qū)分出不同品種。小麥根據(jù)穎果染成的顏色,大麥、燕麥觀察內(nèi)外稃染色深淺,水稻根據(jù)谷?;蛎琢H旧潭龋瑏砼卸ㄊ潜酒贩N還是異品種。
2.2愈傷木酚專門用于大豆品種鑒別的方法。大豆種皮內(nèi)具有過氧化物酶,不同品種由于遺傳基礎(chǔ)不同,過氧化物酶的活性不同,在一定條件下,溶液染色的深淺不同,依此區(qū)分不同品種。
2.3高粱種子氫氧化鉀一漂白粉測定法根據(jù)高粱種皮或種皮下黑色素(單寧酸)有無的差異,區(qū)分高粱品種的方法。
2.4小麥種子的氫氧化鈉測定法當紅白皮不易區(qū)分(尤其是經(jīng)殺菌劑處理的種子)時,可用氫氧化鈉處理,根據(jù)種子淺色和深色加以區(qū)別。
2.5燕麥種子氯化氫測定法將燕麥種子放入氯化氫溶液浸泡,根據(jù)棕褐色(熒光種子)或黃色(非熒光種子)來鑒別不同品種的種子。
2.6燕麥種子熒光測定法應(yīng)用波長360A紫外光照射,根據(jù)內(nèi)外稃有無熒光或強弱進行鑒定。
3生化鑒定技術(shù)
目前,生化鑒定技術(shù)有蛋白質(zhì)電泳法、色譜法鑒定、免疫鑒定技術(shù)等。其中,電泳法是品種純度測定中較為快速準確的方法,是指利用電泳技術(shù)對供檢樣品的種子或幼苗的蛋白質(zhì)進行分離、染色。形成電泳譜帶的差異,并與標準品種相比較,從而鑒定品種純度的一種方法。該法快速、穩(wěn)定、重演性好,具有一定的使用價值,特別是作為種子營銷過程的品種純度快速驗證方法。但對于某些遺傳組成非常接近的品種,不易找到特異蛋白,采用蛋白質(zhì)電泳難以發(fā)現(xiàn)特征帶,不容易鑒別。
3.1同工酶電泳技術(shù)酶是生物代謝申的一種特殊蛋白質(zhì).同工酶是指同一生物體或同一組織中催化相同化學反應(yīng),結(jié)構(gòu)不同的一類酶。其結(jié)構(gòu)的差異來源于基因型的差異。在作物種子純度鑒定中,常用的是多態(tài)性較強的脂酶和過氧化物酶,所用方法多為聚丙烯酰胺凝膠電泳法。該方法的缺點是,同工酶往往具有組織或器官特異性,即同一時期不同器官內(nèi)同工酶的數(shù)目不同,某些同工酶在種子貯藏和萌發(fā)過程中,種類數(shù)目易隨生活力和發(fā)育進程的變化而變化,加之種子萌發(fā)速度不一致,所以對品種純度鑒定不利。此外,酶的提取和電泳條件較蛋白質(zhì)要求嚴格,需在低溫下進行。
3.2種子貯藏蛋白電泳技術(shù)種子中所含的貯藏蛋白質(zhì)可分為清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白、谷蛋白等。目前鑒定品種的常用電泳方法有:鑒定小麥和大麥品種醇溶蛋白聚丙烯酰胺凝膠電泳標準程序;鑒定小麥谷蛋白、豌豆屬和黑麥草屬的SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳標準方法等。我國GB/T3543“農(nóng)作物種子檢驗規(guī)程”已將“國際種子檢驗規(guī)程”的鑒定小麥和大麥品種的聚丙烯酰胺凝膠電泳標準參照方法列入應(yīng)用。2001年農(nóng)業(yè)部頒布了“玉米種子純度鹽溶蛋白電泳鑒定方法”(NY/T449-2001)。
4DNA分子標記鑒定技術(shù)
通過對品種DNA的多態(tài)性即DNA堿基序列的差異進行分析,從而鑒別不同品種。其檢測對象是種子的DNA片段(基因),沒有器官的特異性,在植物體的各個組織、各個發(fā)育時期均可檢測;不受環(huán)境的影響,不存在表達與否的問題;數(shù)量極多,遍及整個基因組,多態(tài)性豐富;準確性高;重復(fù)性好;分離出的樣品DNA在適宜條件下可長期保存,這對進行追溯性或仲裁性鑒定是非常有利的。但DNA分子標記技術(shù)因所需儀器精密、藥品昂貴,程序復(fù)雜等,還沒有大規(guī)模的應(yīng)用于品種純度鑒定。
辣椒的貯藏保鮮技術(shù)
張彥生
由于辣椒生產(chǎn)的季節(jié)性,使得淡旺季矛盾較為突出,因此,搞好辣椒貯藏不僅可以調(diào)節(jié)市場的產(chǎn)銷矛盾,也可增加經(jīng)濟收入。
1貯藏特性
1.1對低溫的敏感性辣椒果實對低溫比較敏感,當環(huán)境溫度低于6℃時,若長期貯藏就可能產(chǎn)生冷害。辣椒受到冷害后,種子和花萼發(fā)生褐變,果皮色澤變暗,產(chǎn)生不規(guī)則的凹陷斑點,不能正常后熟,繼而感染病菌,造成腐爛。
1.2對二氧化碳的敏感性一定濃度的二氧化碳對辣椒有保鮮、保綠作用,當二氧化碳濃度超過一定濃度時就會引起傷害,造成萼片褐變和果肉腐爛。不同品種以及不同產(chǎn)地的辣椒對二氧化碳的忍耐力不同,在實際操作中應(yīng)掌握在2%以下為安全范圍。
1.3易失水收獲后的辣椒極易失水,使得果梗變干,果皮皺縮,所以要求貯藏過程中采取保濕措施。但是如果貯藏環(huán)境中濕度過大,特別是結(jié)露水過多,極易引起辣椒腐爛變質(zhì)。
1.4易轉(zhuǎn)紅辣椒采收后有后熟過程,即山青綠色轉(zhuǎn)為紅色和黃色,由硬變軟??刂妻D(zhuǎn)紅的關(guān)鍵措施是控制溫度。
2對貯藏條件的要求
2.1溫度溫暖潮濕地區(qū)種植的辣椒比寒冷干燥地區(qū)的辣椒對低溫更敏感,同樣晚秋季節(jié)采收的辣椒比夏季采收的辣椒耐低溫能力強。晚熟品種比早熟品種耐低溫。貯藏溫度可根據(jù)不同地區(qū)而定,寒冷、干燥和晚熟品種一般可控制在7-8℃,夏季和潮濕地區(qū)采收的辣椒貯藏一般不低于9℃。相對濕度90-95%,過低果實易失水、萎蔫、果皮皺縮;過高又易引起腐爛。
2.2氣體成分在實際貯藏中,可通過選擇透氣性好的保鮮膜和控制裝果數(shù)量,來控制氧和二氧化碳的濃度,一般維持氧2-5%,二氧化碳1-2%,過量的二氧化碳可用消石灰來吸收。
3影響辣椒耐貯性的因素
3.1品種選擇辣椒品種間耐貯性差異較大。果皮厚、表皮光亮、褶皺少、果實干物質(zhì)含量較高、色澤濃綠的晚熟品種較耐貯藏,如茄門、世界冠軍、巴彥、中椒4號等,早中熟尖椒類不耐貯藏。
3.2栽培管理果實采收后的生理狀態(tài),包括耐貯性和抗病性,是在田間生長條件下形成的。果實的生育特性、地區(qū)氣候、土壤條件和管理措施等,都會對果實的品質(zhì)及貯藏特性產(chǎn)生直接或間接的影響。因此,辣椒防腐必須從田間種植開始,在采收前的10-15天可噴施適當?shù)臍⒕鷦缂谆胁冀?、克菌丹、乙磷鋁、代森錳鋅等,盡可能地消除從田間帶來的病菌。
3.3采收期的確定和采收技術(shù)采收期對辣椒的耐貯性有較大影響,9月下旬(霜前一周)采收的果實較耐貯藏,可貯兩個月以上。而8月份正值高溫多雨季節(jié),田間帶病較多,這時采收的果實只能貯一個月左右。長期貯藏的辣椒要選果實充分膨大、果肉厚而堅硬、光亮而未轉(zhuǎn)紅的綠熟果。采收應(yīng)在晴天早晨氣溫較低對進行,戴絨線手套握住果梗采摘,防止果實和果柄受傷,也可用平頭鋒利的剪刀采摘。輕拿輕放,盡量避免機械傷的產(chǎn)生。
4貯藏技術(shù)
4.1貯前準備及預(yù)冷
貯前準備包括貯藏架及塑料箱、紙箱和保鮮膜袋等。架子可選用平架或立架兩種。平架要離開地面20cm,立架則要分層搭起,搭架材料最好選用角鐵,架寬為60em-1.2m,層高40-50cm,長和高視庫位而定,架與架之間要留50-70cm,架子要保持堅固平穩(wěn)。搭架后,選用庫房專用煙霧消毒劑或硫磺點燃密閉24小時,打開庫門窗排出庫內(nèi)殘留霧。貯藏用具包括塑筐、紙箱等,要進行消毒處理。在辣椒入貯前應(yīng)開機降溫。采收后的辣椒,在低于貯藏溫度1℃的條件下預(yù)冷1-2天,以減少呼吸消耗,保持新鮮,同時還可避免裝袋后結(jié)露,減少腐爛。剔除紅果、病果、蟲果及傷果。
4.2保鮮庫貯藏法
4.2.1大帳貯藏將預(yù)冷好的辣椒裝入消過毒的箱內(nèi),每箱5-10kg,放入架上。在上架前將備好的2.3-3nma透氣性好的塑料膜將架底鋪好,辣椒上架冷透后要迅速扣帳密封,并在帳的四周開幾個8-10cm的小窗,便于通風補氧,降低二氧化碳濃度。一般貯藏前期15-20天補氧一次,后期7-10天補氧一次(每1次補氧5-10分鐘)。為防止下部二氧化碳積聚,引起傷害,可在帳內(nèi)撒一些消石灰,來吸收多余的二氧化碳。
4.2.2小包裝平架貯藏將預(yù)冷好的辣椒裝入箱內(nèi),每箱不超過5kg,把透氣性好的保鮮袋套在箱子的外圍,注意裝箱易少不易多,過多會引起二氧化碳積聚,造成腐爛。碼垛時,垛與垛之間要留5-10cm的空隙,庫頂要留50-70cm,架底要撒一層消石灰。在貯藏時最好使用辣椒防瘋劑,嚴格把關(guān),可貯60-70天。
4.3民間土藏法
4.3.1溝藏在背陰處挖寬和深各1m,長依地形而定。將采收后的辣椒直接放人溝內(nèi),厚度不超過50cm,在溝底鋪一層沙子,將辣椒散放于上,上面蓋一層稻殼或沙子,頂上要蓋草簾等保溫防寒物。此法可貯40-50天。
4.3.2窯洞貯藏采用筐裝的形式,每筐容量以10-15kg為宜。先在筐內(nèi)襯一層薄紙,裝滿辣椒后上面蓋一層紙,加蓋,成“晶”字形堆碼,這種方法容易失水,要注意保持窯洞內(nèi)的濕度,10天左右檢查一次,挑出紅果和腐爛果。夜間氣溫低時打開窯洞門通風降溫,要保持濕度注意加濕。
4.3.8帶秸稈民宅貯藏晚秋辣椒基本成熟后,將帶秸稈的辣椒用鐮刀從根部割起。運輸時輕裝、輕拿。先用0.5%的漂白粉水噴灑房內(nèi)的墻壁和地面進行消毒,然后將帶秸稈的辣椒整齊地碼在房內(nèi),最好垛與垛之間留50-70cm人行道。等外界氣溫過低時要堵好門窗,注意保溫加濕(加濕可用濕草簾覆蓋),這樣也可貯藏40-50天。