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多耐藥臨床分離株結(jié)核分支桿菌耐藥基因rpsL的克隆表達(dá)及功能的初步研究

2005-04-29 00:44:03張萬(wàn)江鄧喜玲曹旭東王曉櫻
生命科學(xué)研究 2005年1期
關(guān)鍵詞:克隆功能

張萬(wàn)江 鮑 朗 鄧喜玲 吳 芳 曹旭東 王曉櫻

摘要:制備多耐藥臨床分離株結(jié)核分支桿團(tuán)基因組DNA,PCR擴(kuò)增其耐藥基因rpsL基因和rrS基因,同時(shí)測(cè)分析,結(jié)果顯示該株多耐藥臨床分離結(jié)核分支桿菌的rpsL基因的93、94bp處的堿基發(fā)生了突變,堿基C、C突變?yōu)門(mén)、T使得相對(duì)應(yīng)的編碼氨基酸由脯氨酸(Pro)突變?yōu)榱涟彼幔↙eu);而rrS基因未發(fā)生核苷酸的插入、缺失或取代;進(jìn)一步構(gòu)建該株多耐藥臨床分離株結(jié)核分支桿菌耐藥基因rpsL高效原核表達(dá)重組載體pGEX-λT/rpsL,所構(gòu)建的重組質(zhì)粒pGEX-λT/rpsL在大腸桿菌中高效表達(dá)了38kD的融合蛋白。結(jié)果提示,該株多耐藥臨床分離株結(jié)核分支桿菌對(duì)鏈霉素耐藥僅僅是由于rpsL基因的個(gè)別堿基突變,是單基因型的,在國(guó)內(nèi)外屬首次研究發(fā)現(xiàn)。

關(guān)鍵詞:結(jié)核分支桿菌;耐藥基因rpsL;克?。还δ?/p>

中圖分類(lèi)號(hào):Q78 R378

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A

文章編號(hào):1007-7847(2005)01-0043-06

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